類聚異戊二烯產(chǎn)物一類以焦磷酸異戊二烯酯聚合形成的聚合產(chǎn)物,類聚異戊二烯產(chǎn)物包括低聚產(chǎn)物和高聚產(chǎn)物,其都有很廣泛的應(yīng)用價值。低聚產(chǎn)物如角鯊烯作為保濕劑和潤膚劑廣泛用于化妝品中,并有多種促進(jìn)健康的功能,包括抑制腫瘤,增強(qiáng)免疫力等作用。高聚產(chǎn)物如聚異戊二烯作為天然橡膠主要應(yīng)用于制造輪胎、膠乳、膠鞋、膠帶等。但目前兩者在大量生產(chǎn)上都受到限制,因此開發(fā)類聚異戊二烯產(chǎn)物的合成生物方法具有重要的應(yīng)用價值。本課題在合成生物學(xué)的基礎(chǔ)上進(jìn)行代謝工程的構(gòu)建,主要是以大腸桿菌為宿主菌,構(gòu)建甲羥戊酸途徑(MVA pathway)的完整途徑。通過微生物細(xì)胞來生產(chǎn)目標(biāo)產(chǎn)物角鯊烯和聚異戊二烯。本課題主要工作:(1)甲羥戊酸菌株的優(yōu)化�；跇�(gòu)建甲羥戊酸上游代謝途徑pET28a-ES,將其酶切篩選后進(jìn)行大腸桿菌為宿主菌的優(yōu)化。首先對大腸桿菌宿主菌優(yōu)化時選取了E.coli DH5α和E.coli BL21兩種宿主菌進(jìn)行比較優(yōu)化,明確E.coli BL21對于甲羥戊酸代謝途徑的適配性更好;然后發(fā)酵培養(yǎng)基選取了 LB培養(yǎng)基、M9培養(yǎng)基和X培養(yǎng)基三種培養(yǎng)基進(jìn)行比較優(yōu)化,經(jīng)比較菌株在X培養(yǎng)基中發(fā)酵生長最佳。其中實(shí)驗(yàn)菌株BLES在X...

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２甲羥戊酸途徑??Ｆｉｇ．?１－２?ＭＶＡ?ｐａｔｈｗａｙ??－

二甲基丙烯基焦磷酸（ＤＭＡＰＰ）。??２?１?Ａｃｅｔｙｌ－ＣＯＡ?？?？?Ｊ?ＤＭＡＰＰ??＾ＳＣｏＡ?〇－ｐ＿〇＿ｐ＿〇—??〇?０??１ＡＡＣＴ?Ａ??Ｔ?ＩＤ１??９?９?Ａｃｅｔｏａｃｅｔｙｌ－ＣｏＡ?〇?９?Ｉ?ＩＰＰ??八?ＳＣ０Ａ?Ｈ??＾?ＨＭＧＳ?ｔ?ＭＶＤ１....

圖１－３角鯊烯合成的代謝途徑??Ｆｉｇ．?１－３?Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ?ｐａｔｈｗａｙ?ｏｆ?ｓｑｕａｌｅｎｅ?ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ??

??角鯊烯生物合成中ＭＶＡ途徑大致可以分為三個階段：（１）生成乙酰輔酶Ａ；?（２）在??ＭＶＡ途徑的代謝過程中將乙酰輔酶Ａ轉(zhuǎn)變生成ＩＰＰ和ＤＭＡＰＰ或ＤＭＡＤＰ、法尼基??焦磷酸（ＦＰＰ或ＦＤＰ）；?（３）ＦＰＰ聚合形成角鯊烯分子［４２＼其中由乙酰－ＣｏＡ合成ＩＰＰ、??ＤＭＡＰ....

圖１－４橡膠樹中橡膠的生物合成??Ｆｉｇ．?１－４?Ｂｉｏｓｙｎｔ?ｈｅｓｉｓ?ｏｆ?ｒｕｂｂｅｒ?ｉｎ?ｒｕｂｂｅｒ?ｔｒｅｅｓ??ｃ／ｒ，

ｐｈａｔｅ??〇?—?�。�，．〇＿￥＿〇’＊＂、？一’、？?一￣＇’八?＇?ｏｈ??Ｏ?Ｏ?Ｉ??１?ＥＲＧ１９??〇?〇?Ｊ?ＯＭＡＰＰ?ＩＤＵ?？?？產(chǎn)、Ｊ＾、�。穑�??〇—ｐ—〇—ｐ?—〇?、－’、、＇??ｌｉ?ｉ；?Ｈ?ＩＩ??〇?〇?？?Ｏ?〇?，??ｆｄｓ?Ｉ????....

圖１－５本課題的類聚異戊二烯產(chǎn)物的代謝途徑??Ｆｉｇ．?１－５?Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ?ｒｏｕｔｅ?ｏｆ?ｐｏｌｙｉｓｏｐｒｅｎｅ－ｌｉｋｅ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?ｔｈｉｓ?ｓｕｂｊｅｃｔ??

?第一章緒論???￣?￣＇￣＇

本文編號：3893203