為了得到環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)的落葉松植株,本研究以日本落葉松胚性愈傷組織為材料,對落葉松體細(xì)胞胚發(fā)生的不同階段、體細(xì)胞胚發(fā)育及mtl D基因的遺傳轉(zhuǎn)化進(jìn)行研究。(1)采用正交設(shè)計確定日本落葉松體細(xì)胞胚誘導(dǎo)的ABA、PEG 4000、Ag NO₃最佳濃度,并將體細(xì)胞胚接種至AC濃度0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 g/L的萌發(fā)培養(yǎng)基,統(tǒng)計萌發(fā)數(shù)量。結(jié)果表明適合日本落葉松體細(xì)胞胚誘導(dǎo)的濃度是ABA 20 mg/L+PEG4000 120 g/L+Ag NO₃10 mg/L,AC 0.4～0.6 g/L有利于體細(xì)胞胚萌發(fā)。(2)采用正交設(shè)計研究胚性愈傷組織在2,4-D 0.15、0.3、0.5 mg/L、6-BA 0、0.15、0.3 mg/L和ABA0、0.5、1.0 mg/L的增殖情況,采用析因設(shè)計研究懸浮細(xì)胞在2,4-D0.15、0.3、0.5 mg/L和6-BA 0、0.15、0.3 mg/L的鮮重增長情況。然后,選擇對數(shù)期的胚性愈傷組織和懸浮細(xì)胞分別驗證其體胚發(fā)生能力,結(jié)合兩結(jié)果確定兩種培養(yǎng)方式的最佳激素濃度。最后,分別研究了GA

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1日本落葉松體細(xì)胞胚發(fā)生過程的形態(tài)學(xué)觀察Figure2-1MorphologicalobservationofsomaticembryogenesisofLarixkaempferi

體細(xì)胞胚發(fā)生體系的建立132-1H)；中期子葉胚在接種28~35天形成，此時體胚子葉伸長(圖2-1I)；接種35~42天，形成晚期子葉胚，體胚子葉逐漸張開(圖2-1J)，然后逐漸發(fā)育為成熟子葉胚。試驗結(jié)果表明，經(jīng)歷42天的誘導(dǎo)，體細(xì)胞胚經(jīng)一系列變化后最終發(fā)育為成熟子葉胚。圖2-1....

圖2-3日本落葉松懸浮細(xì)胞鮮重生長曲線

日本落葉松體細(xì)胞胚發(fā)生及mtlD基因的遺傳轉(zhuǎn)化14圖2-2日本落葉松胚性愈傷組織鮮重生長曲線Figure2-2GrowthcurveoffreshweightofproembryogenicmassesforLarixkaempferi2.3.3懸浮細(xì)胞培養(yǎng)日本落葉松懸浮細(xì)胞生長....

圖2-4不同處理的日本落葉松體細(xì)胞胚胎發(fā)生數(shù)量Figure2-4NumberofSomaticembryogenesisforLarixkaempferitreatedwithdifferenthormones

體細(xì)胞胚發(fā)生體系的建立15素對體細(xì)胞胚發(fā)生各階段的影響提供依據(jù)。圖2-4不同處理的日本落葉松體細(xì)胞胚胎發(fā)生數(shù)量Figure2-4NumberofSomaticembryogenesisforLarixkaempferitreatedwithdifferenthormones注：不....

圖2-5萌發(fā)的日本落葉松體細(xì)胞胚Figure2-5SomaticembryoofgerminatingofLarixkaempferi

日本落葉松體細(xì)胞胚發(fā)生及mtlD基因的遺傳轉(zhuǎn)化

本文編號：3891977