根據(jù)全長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),克隆得到青綠苔草滯綠基因CbSGR(GenBank登錄號(hào):MN746439),其完整編碼區(qū)全長(zhǎng)為771bp,編碼256個(gè)氨基酸。NCBI Nr數(shù)據(jù)庫(kù)Blast結(jié)果顯示,CbSGR屬于STAY-GREEN超家族,系統(tǒng)進(jìn)化分析表明CbSGR與油棕和海棗SGR的相似度最高。為研究CbSGR的轉(zhuǎn)錄激活特性,構(gòu)建pGBKT7-CbSGR載體并轉(zhuǎn)化Y2HGold酵母感受態(tài)細(xì)胞,其在三缺培養(yǎng)基(SD-Trp-His-Ade)上不能生長(zhǎng),表明CbSGR不具有轉(zhuǎn)錄激活活性。利用本生煙草瞬時(shí)表達(dá)方法觀察亞細(xì)胞定位情況,結(jié)果表明CbSGR定位于葉綠體。利用花序侵染法轉(zhuǎn)化擬南芥,過(guò)表達(dá)株系表現(xiàn)出黃化,葉綠素含量顯著低于對(duì)照且凈光合速率明顯小于對(duì)照。熒光定量分析結(jié)果表明,過(guò)表達(dá)CbSGR轉(zhuǎn)基因株系中光合效率相關(guān)的AtCAB1、AtPSAF、AtRCA基因表達(dá)量均顯著低于對(duì)照,而衰老相關(guān)的AtNYC1、AtNOL、AtSEN、AtSAG12和AtSAG14基因表達(dá)量均顯著高于對(duì)照,表明CbSGR的過(guò)表達(dá)降低了光合效率并加速了植物衰老。CbSGR是一個(gè)調(diào)節(jié)植物葉綠素降解和衰老的關(guān)鍵基因,為后續(xù)通...

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