香菇萎銹靈抗性基因定點突變載體構(gòu)建與遺傳轉(zhuǎn)化應(yīng)用研究
發(fā)布時間:2024-01-17 19:45
香菇(Lentinula edodes)是一類產(chǎn)量豐富,栽培區(qū)域廣泛的食用菌。其味道鮮美,本身具有特殊的香味,深受老百姓的喜愛;擁有豐富的營養(yǎng)成分,具有極高價值,也是眾多科研工作者研究的對象。香菇的遺傳及功能基因研究伴隨著香菇全基因組測序的完成和公布[1-2]成為熱點。遺傳及基因功能研究的基礎(chǔ)是完善的遺傳轉(zhuǎn)化體系。在眾多的遺傳轉(zhuǎn)化方法中都需要使用易于識別的標(biāo)記基因,目的是方便快捷的篩選出轉(zhuǎn)化子,F(xiàn)階段,食用菌中常用篩選標(biāo)記是潮霉素抗性基因(Hyg R)—一種外源的抗生素抗性標(biāo)記基因,在轉(zhuǎn)化過程中不穩(wěn)定且會對轉(zhuǎn)化子產(chǎn)生一定的毒害。當(dāng)篩選完成后,選擇標(biāo)記基因的存在是沒有價值的,甚至是有副作用的。特別對于香菇這種用于食用的食品,轉(zhuǎn)入任何非內(nèi)源的基因片段都是有風(fēng)險的,而同源的標(biāo)記基因來自受體或其同屬本身,可以避免這種風(fēng)險。同時同源基因的轉(zhuǎn)化能夠引導(dǎo)目的載體在受體染色體的同源部位整合,避免甲基化,有利于基因的表達(dá),能有效提高目的基因的轉(zhuǎn)化率和整合率[3]。本研究的目的是在香菇中建立以萎銹靈抗性基因為篩選標(biāo)記的轉(zhuǎn)化方法,將同源篩選標(biāo)...
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
本文編號:3879544
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