耳聾基因編碼蛋白CBB2隸屬于鈣整合素結合蛋白家族。此蛋白家族包括CIB1至CIB4四個蛋白,它們均包含多個鈣離子結合結構域(EF-hand)。目前對于CIB蛋白家族的研究主要集中于CIB1在細胞增殖和凋亡、血管再生以及細胞骨架形成等過程中的作用。有研究表明CIB2的突變是導致人類非綜合征型耳聾DFNB48和綜合征型耳聾USHIJ的原因,但CIB2在聽覺中的功能及突變致聾機制日前還不清楚。我們首先在mRNA水平檢測了小鼠內耳中Cib1至Cib4的表達情況,結果顯示Cib1和Cib2在耳蝸中有較高水平的表達。因此我們利用CRISPR/Cas9基因編輯技術構建了Cib1和Cib2敲除小鼠。Cib1的敲除并沒有影響小鼠的聽覺功能,而敲除了Cib2之后小鼠的聽力受到了嚴重的損傷。在進一步的研究中,我們發(fā)現Cib2敲除之后小鼠的聽纖毛發(fā)育出現了明顯的異常。在Cib2敲除小鼠中有相當數量外毛細胞的靜纖毛束不能呈現正常的“V”字型,并且第二排靜纖毛發(fā)生了異常延長的現象。同時我們觀測到在Cib2敲除小鼠的部分內毛細胞中動纖毛未能正常退化,靜纖毛發(fā)生了一定程度的融合。我們還檢測到Cib2敲除小鼠毛細胞機...

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
第一部分 Cib2及其家族基因在小鼠各組織中的表達
    1.1 材料試劑與主要儀器設備
    1.2 實驗方法
    1.3 實驗結果
第二部分 Cib1以及Cib2敲除小鼠的構建及鑒定
    2.1 材料試劑與主要儀器設備
    2.2 實驗方法
    2.3 實驗結果
第三部分 Cib1敲除對小鼠聽力沒有影響
    3.1 材料試劑與主要儀器設備
    3.2 實驗方法
    3.3 實驗結果
第四部分 Cib2敲除導致嚴重耳聾
    4.1 材料試劑與主要儀器設備
    4.2 實驗方法
    4.3 實驗結果
第五部分 Cib2敲除影響小鼠聽纖毛發(fā)育
    5.1 材料試劑與主要儀器設備
    5.2 實驗方法
    5.3 實驗結果
第六部分 Cib2敲除嚴重影響小鼠毛細胞MET通道功能
    6.1 材料試劑與主要儀器設備
    6.2 實驗方法
    6.3 實驗結果
第七部分 討論
參考文獻
致謝
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本文編號：3850022