近年來,細(xì)菌耐藥性傳播和細(xì)菌致病性成為當(dāng)前社會面臨的公共衛(wèi)生難題之一。銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一種環(huán)境中普遍存在的條件致病菌,通常以生物膜形式存在,能夠分泌多種毒力因子,還可以通過多種方式獲得抗生素耐藥性,進(jìn)而給臨床治療和生態(tài)環(huán)境帶來更加嚴(yán)重的威脅。質(zhì)粒介導(dǎo)的接合轉(zhuǎn)移是細(xì)菌耐藥性傳播重要方式之一。生物膜的形成一方面可保護(hù)細(xì)菌免受抗菌藥物的作用,增強(qiáng)細(xì)菌群體的耐藥性。另一方面,由于生物膜內(nèi)細(xì)菌豐度較高,給耐藥基因的接合轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了良好的條件。銅綠假單胞菌的致病性主要?dú)w因于毒力因子的分泌,而毒力因子的分泌也與生物膜的形成密切相關(guān)。因此,生物膜的調(diào)控是控制細(xì)菌耐藥性和致病性的關(guān)鍵之一。有研究表明,群感效應(yīng)在控制細(xì)菌生物膜形成和毒力因子產(chǎn)生中具有舉足輕重的作用。因此,借助群感淬滅效應(yīng)調(diào)控細(xì)菌生物膜和毒力因子分泌,有可能成為控制細(xì)菌耐藥性污染和致病性的有效方式。有研究表明,植物提取物香草醛對可作為一種天然的群感效應(yīng)抑制劑來調(diào)控細(xì)菌群感效應(yīng)系統(tǒng)。本文考察了銅綠假單胞菌群感效應(yīng)調(diào)控對其生物膜的形成及生物膜內(nèi)細(xì)菌耐藥基因接合轉(zhuǎn)移的影響機(jī)制,探索了香草醛對耐藥細(xì)...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 細(xì)菌耐藥性污染與細(xì)菌感染
        1.1.1 細(xì)菌耐藥性研究現(xiàn)狀
        1.1.2 耐藥基因的傳播擴(kuò)散
        1.1.3 致病菌的耐藥性和致病性
    1.2 耐藥細(xì)菌的生物膜
        1.2.1 銅綠假單胞菌生物膜的形成
        1.2.2 生物膜與細(xì)菌耐藥性
        1.2.3 生物膜內(nèi)耐藥基因轉(zhuǎn)移
    1.3 細(xì)菌的群體調(diào)控
        1.3.1 細(xì)菌群感效應(yīng)概述
        1.3.2 群感效應(yīng)抑制劑
        1.3.3 銅綠假單胞菌的群感效應(yīng)系統(tǒng)
        1.3.4 群感效應(yīng)對生物膜和耐藥基因轉(zhuǎn)移的調(diào)控
        1.3.5 群感效應(yīng)對毒力因子的調(diào)控研究
    1.4 研究目的、意義和內(nèi)容
        1.4.1 本研究的目的和意義
        1.4.2 研究的主要內(nèi)容
第二章 群感效應(yīng)調(diào)控對生物膜形成和耐藥性轉(zhuǎn)移的影響研究
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)質(zhì)粒、菌株與培養(yǎng)
        2.2.3 含RP4質(zhì)粒大腸桿菌的構(gòu)建
        2.2.4 亞抑菌濃度的測定
        2.2.5 生長曲線的繪制
        2.2.6 接合轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 RNA提取、cDNA合成及RT-qPCR定量
        2.2.8 信號分子的提取
        2.2.9 生物膜的培養(yǎng)及其含量的測定
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 RP4質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌結(jié)果
        2.3.2 香草醛亞抑菌濃度的確定
        2.3.3 香草醛對耐藥菌株生長的影響
        2.3.4 QS相關(guān)基因表達(dá)水平的測定
        2.3.5 AHL信號分子的檢測
        2.3.6 香草醛對耐藥菌株生物膜形成的影響
        2.3.7 香草醛對RP4質(zhì)粒接合轉(zhuǎn)移的影響
    2.4 本章小結(jié)
第三章 香草醛對銅綠假單胞菌毒力因子的影響
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        3.2.2 綠膿菌素含量測定
        3.2.3 細(xì)菌的蹭行運(yùn)動檢測
        3.2.4 RNA提取、cDNA合成及qPCR定量
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 香草醛對PAO1綠膿菌素含量的影響
        3.3.2 細(xì)菌的蹭行運(yùn)動性
        3.3.3 PAO1毒力基因motA表達(dá)水平的測定
    3.4 本章小結(jié)
第四章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
學(xué)位論文評閱及答辯情況表



本文編號：3847749