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神經(jīng)營養(yǎng)因子-3基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細胞和水凝膠聯(lián)合應用對脊髓損傷模型大鼠的治療作用研究

發(fā)布時間:2023-08-08 20:16
  目的研究骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)、神經(jīng)營養(yǎng)因子-3(neurotrophic factor-3,NT-3)、水凝膠(hydrogels)對脊髓損傷的聯(lián)合治療作用。方法首先,培養(yǎng)大鼠BMSC基因修飾,使其過表達NT-3,制作水凝膠并搭載細胞。然后,建立大鼠急性不完全性脊髓損傷模型并植入相應治療。最后,術后通過運動行為學(Basso Beatlie Bresnahan,BBB評分)和病理學檢測其對脊髓損傷的治療作用。結(jié)果各個聯(lián)合治療組大鼠BBB評分均有不同程度增加,BMSC+NT-3+hydrogels組治療作用最為明顯。免疫組織化學檢測顯示各個聯(lián)合治療組神經(jīng)元、神經(jīng)纖維數(shù)目均有不同程度增加,星形膠質(zhì)細胞數(shù)目較少。治療組中,BMSC+NT-3+hydrogels組大鼠神經(jīng)元、神經(jīng)纖維數(shù)目最多,星形膠質(zhì)細胞數(shù)目最少。所有結(jié)果組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論細胞(BMSC)、因子(NT-3)和支架(hydrogels)在治療脊髓損傷中相互促進,聯(lián)合移植于急性不完全性脊髓損傷模型大鼠,可提升模型大鼠后...

【文章頁數(shù)】:12 頁

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 實驗動物
    1.2 主要試劑與儀器
    1.3 實驗方法
        1.3.1 骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)、基因修飾、鑒定與誘導分化
        1.3.2 免疫印跡試驗(Western blot)檢測基因編輯細胞后相關蛋白的表達
        1.3.3 水凝膠的制備
        1.3.4 動物分組及急性不完全性脊髓損傷大鼠模型構建
        1.3.5 運動行為學檢測(BBB)
        1.3.6 組織取材及切片
        1.3.7 染色方法
    1.4 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染的形態(tài)觀察
    2.2 基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細胞的蛋白表達驗證
    2.3 骨髓間充質(zhì)干細胞的流式細胞學驗證
    2.4 骨髓間充質(zhì)干細胞細胞生長曲線活力檢測
    2.5 骨髓間充質(zhì)干細胞成脂、成骨誘導分化后細胞生長情況和形態(tài)
    2.6 水凝膠支架的形態(tài)觀察
    2.7 急性不完全性脊髓損傷大鼠模型的建立與治療
    2.8 SD大鼠運動行為學BBB評分
    2.9 手術造模治療8周后大鼠組織病理學檢測
3 討論



本文編號:3840410

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