目的:觀察牙周炎疫苗佐劑白細胞介素-15(interleukin-15,IL-15)對SD大鼠腸系膜淋巴結(jié)B淋巴細胞增殖的影響,初步探討用IL-15提高基因疫苗免疫效應(yīng)的可能性。方法:將牙周炎基因疫苗pVAX1-HA2-FimA/IL-15(A組)、pVAX1-HA2-FimA(B組)和生理鹽水(C組)鼻滴免疫SD大鼠,采用磁珠分選法分離純化腸系膜淋巴結(jié)B細胞,CCK-8法檢測B細胞的數(shù)量,RT-qPCR法檢測CKs2基因相對表達量變化,ELISA法檢測培養(yǎng)液中特異性IgA的表達水平。結(jié)果:A組B細胞增殖水平高于B組和C組(P <0.05);A組B淋巴細胞CKs2 mRNA相對表達量稍高于B組,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。A組B淋巴細胞分泌的特異性IgA水平均高于B、C組(P<0.05)。結(jié)論:IL-15是一種有效的基因疫苗佐劑,使用本課題組構(gòu)建的牙周炎基因疫苗能夠促進B細胞增殖,進而提高特異性IgA抗體的表達水平。

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 實驗動物分組
        1.2.2 動物免疫及樣本采集
        1.2.3 大鼠B淋巴細胞的處理與培養(yǎng)
        1.2.4 CCK-8法檢測B細胞的增殖
        1.2.5 RT-q PCR法檢測CKs2 m RNA的相對表達量
        1.2.6 ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清液中特異性Ig A的表達水平
    1.3 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 B淋巴細胞的活細胞比率
    2.2 B細胞增殖水平
    2.3 CKs2基因相對表達量比較
    2.4 特異性Ig A抗體表達水平
3 討論



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