菰黑粉菌(Ustilago esculenta)是一種二態(tài)性真菌,具有侵染菰(Zizania latifolia)植株的能力,并可使植株莖部膨大形成茭白。二型態(tài)轉(zhuǎn)換對(duì)菰黑粉菌的侵染能力及致病性至關(guān)重要。促絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信號(hào)級(jí)聯(lián)途徑和環(huán)化腺苷酸介導(dǎo)的蛋白激酶A (cyclic adenosine monophosphate-protein kinase A, cAMP-PKA)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑是真菌二型態(tài)轉(zhuǎn)換的核心。本研究發(fā)現(xiàn),外源添加cAMP后單倍體出現(xiàn)多位點(diǎn)芽殖現(xiàn)象,且融合菌絲生長(zhǎng)受到影響。進(jìn)一步克隆得到了編碼菰黑粉菌PKA催化亞基的基因UePkaC (PkaC like protein in Ustilago esculenta)基因(GenBank No.KR870334.1)。序列分析結(jié)果顯示,該基因全長(zhǎng)1 346 bp,有1個(gè)內(nèi)含子,兩個(gè)外顯子構(gòu)成大小為1 233 bp的開放閱讀框,編碼410個(gè)氨基酸。該氨基酸序列與其他物種中PKA催化亞基的氨基酸序列同源,如大麥堅(jiān)黑粉菌(U. hordei)、玉...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 培養(yǎng)基與試劑
    1.3 菰黑粉菌Ue Pka C基因的克隆與生物信息學(xué)分析
    1.4 菰黑粉菌生長(zhǎng)速率的測(cè)定
    1.5 體外融合實(shí)驗(yàn)
    1.6 熒光定量PCR
    1.7 Ue Pka C基因敲除菌株的構(gòu)建
    1.8 菰植株的侵染
    1.9 共聚焦顯微觀察
2 結(jié)果與分析
    2.1 外源添加c AMP對(duì)菰黑粉菌單倍體生長(zhǎng)與融合的影響
    2.2 Ue Pka C基因的克隆與鑒定
    2.3 Ue Pka C基因的表達(dá)模式分析
    2.4 Ue Pka C基因的缺失對(duì)單倍體生長(zhǎng)形態(tài)及其生長(zhǎng)速率的影響
    2.5 Ue Pka C基因缺失對(duì)菰黑粉菌融合的影響
    2.6 Ue Pka C基因缺失對(duì)a基因表達(dá)的影響
    2.7 Ue Pka C基因的缺失對(duì)菌株致病力的影響
3 討論
4 結(jié)論



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