鐵皮石斛DoLIS基因克隆與茉莉酸甲酯誘導表達分析
發(fā)布時間:2023-05-03 19:27
【目的】克隆鐵皮石斛(Dendrobium officinale)芳樟醇合酶(linalool synthase, LIS)基因,分析該基因在鐵皮石斛開花期花、葉、莖和根中的表達及茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate, MeJA)誘導表達模式,以期為進一步鑒定其功能及分析鐵皮石斛單萜類代謝機制奠定基礎!痉椒ā坷肦ACE-PCR和RT-PCR技術克隆DoLIS基因全長cDNA序列和開放閱讀框(open reading frame, ORF),利用ProtParam和BLAST P在線軟件進行理化性質分析和氨基酸同源性比對,采用MEGA 6.0構建系統(tǒng)進化樹。利用qPCR方法分析DoLIS基因在開花期鐵皮石斛花、葉、莖和根中的表達及MeJA處理后葉片中的表達模式。【結果】DoLIS基因cDNA序列全長2 844 bp,含有1個2 538 bp的ORF,編碼845個氨基酸。分子量為98.298 kD,理論等電點為7.04,不穩(wěn)定系數是46.29,屬不穩(wěn)定蛋白。DoLIS蛋白具有TerpenecyclaseplantC
【文章頁數】:7 頁
【文章目錄】:
0 引言
1 材料與方法
1.1 試驗材料和試劑
1.2 試驗方法
1.2.1 總RNA提取和c DNA第1鏈合成
1.2.2 Do LIS基因全長c DNA克隆
1.2.3 Do LIS基因ORF克隆
1.2.4 Do LIS基因生物信息學分析
1.2.5 Do LIS基因表達分析
2 結果與分析
2.1 Do LIS基因全長c DNA克隆
2.2 Do LIS基因ORF的克隆
2.3 DoLIS的生物信息學分析
2.4 Do LIS基因在不同器官的表達
2.5 茉莉酸甲酯對Do LIS基因表達的影響
3 討論與結論
本文編號:3807141
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0 引言
1 材料與方法
1.1 試驗材料和試劑
1.2 試驗方法
1.2.1 總RNA提取和c DNA第1鏈合成
1.2.2 Do LIS基因全長c DNA克隆
1.2.3 Do LIS基因ORF克隆
1.2.4 Do LIS基因生物信息學分析
1.2.5 Do LIS基因表達分析
2 結果與分析
2.1 Do LIS基因全長c DNA克隆
2.2 Do LIS基因ORF的克隆
2.3 DoLIS的生物信息學分析
2.4 Do LIS基因在不同器官的表達
2.5 茉莉酸甲酯對Do LIS基因表達的影響
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