[目的]對(duì)馬尾松β-蒎烯合酶基因PmPinS進(jìn)行克隆,分析其序列特征和高抗易感馬尾松中松材線蟲侵染后的表達(dá)模式,為解析馬尾松抗松材線蟲病機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。[方法]采用PCR擴(kuò)增技術(shù)克隆馬尾松PmPinS的全長(zhǎng)編碼區(qū)序列,進(jìn)行同源氨基酸序列比對(duì)和系統(tǒng)發(fā)育分析,利用生物信息學(xué)方法分析其基因特征;利用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)分析馬尾松蒎烯合酶基因在接種松材線蟲后的高抗和易感馬尾松中的表達(dá)模式。[結(jié)果]克隆獲得馬尾松蒎烯合酶基因的全長(zhǎng)編碼區(qū)序列,包含1 878 bp的完整開放閱讀框,編碼625個(gè)氨基酸,分子量為71.95 kD,二級(jí)結(jié)構(gòu)以α-螺旋和β-折疊為主,含有萜類合酶典型的RR(X)8W、DDXXD和NSE/DTE結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn),PmPinS與扭葉松(-)β-蒎烯合酶聚為一支,序列相似性達(dá)93.16%。對(duì)高抗和易感馬尾松PmPinS在松材線蟲接種后的表達(dá)模式進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),PmPinS在高抗馬尾松中的表達(dá)量顯著高于易感馬尾松,且在接種30 d內(nèi)呈現(xiàn)上升趨勢(shì),而易感馬尾松PmPinS在接種1 d后迅速下降,在接種2 a后,PmPinS表達(dá)量在高抗馬尾松莖部組織特異性高表達(dá)。對(duì)松材線蟲外源...

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