【目的】木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶(XTH)與細(xì)胞壁的生理活動及抗逆性密切相關(guān)。課題組前期對干旱脅迫下大豆轉(zhuǎn)錄組的結(jié)果進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)大豆Glyma.13G095000(GmXTH23)基因是一個編碼木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶(XTH)的基因,基于GmXTH23基因表達(dá)量受干旱脅迫影響顯著的事實,通過生物信息學(xué)、表達(dá)模式分析及抗性鑒定試驗等研究,為進(jìn)一步探究GmXTH23基因的功能提供依據(jù),為大豆抗逆的遺傳改良提供理論參考�！痉椒ā恳詨ㄘS16大豆為試驗材料克隆GmXTH23基因;利用qRT-PCR方法探究基因的表達(dá)模式;利用基因槍法進(jìn)行亞細(xì)胞定位;將GmXTH23基因轉(zhuǎn)入擬南芥中,并進(jìn)行干旱脅迫下的表型試驗;用茚三酮比色法測定游離脯氨酸含量,氮藍(lán)四唑法測定超氧化物歧化酶含量,硫代巴比妥酸比色法測定丙二醛含量�！窘Y(jié)果】GmXTH23在大豆各組織中皆有表達(dá),在莖中的表達(dá)量最高;亞細(xì)胞定位的結(jié)果表明該基因蛋白定位于細(xì)胞膜上;干旱脅迫下的表型試驗結(jié)果表明,過表達(dá)GmXTH23基因的擬南芥植株發(fā)芽率、根長皆高于野生型擬南芥,復(fù)水后恢復(fù)正常的植株比例也相對較高;過表達(dá)株系與野生型株系相比其PRO含量與SOD含量較高...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗材料
        1.1.1 植物材料
        1.1.2 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 大豆基因Gm XTH23的克隆
        1.2.2 Gm XTH23基因的組織表達(dá)及脅迫下的表達(dá)模式分析
        1.2.3 Gm XTH23蛋白亞細(xì)胞定位
        1.2.4 Gm XTH23的遺傳轉(zhuǎn)化
        1.2.5 表型試驗
        1.2.6 相關(guān)指標(biāo)測定
2 結(jié)果分析
    2.1 基因Gm XTH23的克隆及表達(dá)載體構(gòu)建
    2.2 基因Gm XTH23不同組織和逆境脅迫下表達(dá)模式分析
    2.3 Gm XTH23蛋白的亞細(xì)胞定位
    2.4 轉(zhuǎn)基因Gm XTH23擬南芥抗旱性鑒定
    2.5 相關(guān)生理指標(biāo)的測定
3 討論



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