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腺病毒介導(dǎo)的VEGF-165基因過表達(dá)對缺氧性肺動脈高壓新生大鼠肺血管重塑的影響研究

發(fā)布時間:2023-04-02 03:14
  目的:通過觀察缺氧性肺動脈高壓(HPH)新生大鼠肺組織血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和生存素的表達(dá)變化、右心室內(nèi)收縮壓(RVSP)及肺血管重塑情況,探討過表達(dá)的VEGF對新生大鼠肺組織生存素表達(dá)水平的影響及其在HPH新生大鼠肺血管重塑中的作用。方法:將新生大鼠隨機(jī)分為對照組、HPH組與VEGF+HPH組,每組再按觀察時間點(diǎn)分為3天、7天、10天及14天組,VEGF+HPH組新生大鼠轉(zhuǎn)染攜VEGF-165基因與綠色熒光蛋白的腺病毒(Ad-VEGF-165-GFP),次日與HPH新生大鼠共同置于低氧艙內(nèi)建立HPH模型,對照組大鼠則于空氣氧濃度下飼養(yǎng)。各組新生大鼠在相應(yīng)的觀察時間點(diǎn)檢測RVSP,通過免疫熒光觀察腺病毒在肺組織中的轉(zhuǎn)染情況,借助免疫組化技術(shù)評價肺組織VEGF及生存素的表達(dá),于光鏡下觀察肺血管重塑情況并及計算肺血管重塑指標(biāo)。結(jié)果:1)免疫熒光:VEGF+HPH組新生大鼠腺病毒轉(zhuǎn)染后第3天時即可在肺組織中觀察到較明顯的綠色熒光,其強(qiáng)度隨缺氧時間延長而逐漸衰減,至缺氧第14天時已幾乎消失,提示腺病毒成功轉(zhuǎn)染至新生大鼠肺組織;2)RVSP:與對照組相比,HPH組與VEGF+HPH組新生大...

【文章頁數(shù)】:47 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
研究內(nèi)容與方法
    1 研究對象
    2 主要儀器與試劑
        2.1 主要儀器
        2.2 主要試劑
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 實(shí)驗(yàn)動物分組
        3.2 腺病毒轉(zhuǎn)染肺組織
        3.3 建立HPH新生大鼠模型
        3.4 評價HPH新生大鼠模型
        3.5 觀察肺組織腺病毒轉(zhuǎn)染情況
        3.6 觀察肺動脈結(jié)構(gòu)變化并檢測肺血管重塑指標(biāo)
        3.7 免疫組化測定肺組織VEGF的表達(dá)
    4 統(tǒng)計學(xué)分析
    5 技術(shù)路線圖
結(jié)果
討論
小結(jié)
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
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本文編號:3778419

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