玉米(Zea mays L.)是世界上重要的農(nóng)作物,是重要的糧食、飼料和工業(yè)原料。玉米籽粒主要分為三部分:母本組織、胚乳和胚。胚乳占據(jù)了種子的大部分體積,其中貯存的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有碳水化合物、脂肪、蛋白質(zhì)、半纖維素和油脂等。淀粉是碳水化合物基本貯藏形式,占胚乳的60%⁸0%。淀粉的合成涉及到許多酶,包括蔗糖合成酶(SUS)、ADPG焦磷酸化酶(AGPase)、淀粉合成酶(SSs)、淀粉分支酶(SBE)和淀粉去分支酶(DBE)等,這些酶相互協(xié)同、相互影響,合成不同結(jié)構(gòu)和數(shù)量的淀粉。Opaque 2(O2)蛋白在玉米胚乳生長(zhǎng)發(fā)育及代謝調(diào)控中發(fā)揮重要作用。研究表明O2蛋白可能參與淀粉合成代謝調(diào)控。本實(shí)驗(yàn)以構(gòu)建好的o2近等基因系CAL58與CAL58/o2為材料,通過熒光定量PCR、瞬時(shí)表達(dá)、酵母單雜交手段進(jìn)一步分析證實(shí)O2蛋白在淀粉合成途徑中的調(diào)控作用,以期為育種實(shí)踐中應(yīng)用o2培育優(yōu)質(zhì)蛋白玉米(QPM)提供理論支撐。本文的主要研究結(jié)果如下:1.針對(duì)前期篩選出的差異蛋白點(diǎn)以及RNA-Seq中的差異表達(dá)基因,對(duì)CAL58與CAL58/o2近等基因系在10 DAP(Days a...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 玉米及優(yōu)質(zhì)蛋白玉米概述
        1.1.1 玉米是重要農(nóng)作物
        1.1.2 優(yōu)質(zhì)蛋白玉米
    1.2 Opaque2的發(fā)現(xiàn)及研究進(jìn)展
        1.2.1 Opaque2(O2)基因的發(fā)現(xiàn)
        1.2.2 Opaque2(O2)蛋白的研究
    1.3 玉米淀粉合成
        1.3.1 淀粉合成路徑相關(guān)酶
        1.3.2 轉(zhuǎn)錄因子對(duì)淀粉合成有重要調(diào)控作用
    1.4 研究目的和內(nèi)容
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 研究?jī)?nèi)容
        1.4.3 技術(shù)路線
第二章 o2近等基因系中基因差異表達(dá)分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 試驗(yàn)儀器及耗材
        2.1.3 試驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 玉米籽粒胚乳RNA的提取
        2.2.2 引物特異性檢測(cè)結(jié)果
        2.2.3 胚乳中淀粉合成重要基因的相對(duì)表達(dá)量
    2.3 討論
        2.3.1 CAL58及近等基因系中O2基因與靶基因表達(dá)量變化
        2.3.2 Sh1、Sh2及SSIV基因是淀粉合成的關(guān)鍵基因
第三章 O2調(diào)控淀粉合成基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 試驗(yàn)儀器及耗材
        3.1.3 試驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 載體的構(gòu)建及啟動(dòng)子序列分析
        3.2.2 擬南芥原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化熒光信號(hào)檢測(cè)
    3.3 討論
        3.3.1 轉(zhuǎn)錄因子影響下游基因表達(dá)
        3.3.2 O2調(diào)控下游基因
第四章 O2與淀粉合成基因啟動(dòng)子互作調(diào)控位點(diǎn)解析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗(yàn)材料
        4.1.2 試驗(yàn)儀器及耗材
        4.1.3 試驗(yàn)方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 O2蛋白能夠結(jié)合Sh1基因啟動(dòng)子ATG前724 bp⁶94 bp
        4.2.2 O2蛋白與Sh2、SSIV基因啟動(dòng)子結(jié)合位點(diǎn)尚未可知
    4.3 討論
        4.3.1 O2通過結(jié)合O2 box實(shí)現(xiàn)對(duì)下游基因的調(diào)控
        4.3.2 AbA無法抑制部分片段的轉(zhuǎn)錄活性
第五章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3770772