目的探討在中老年尼古丁依賴人群中5-HT2AR基因多態(tài)性分布特征及初步探討尼古丁依賴人群的5-HT2AR基因啟動子區(qū)甲基化水平特征。方法第一章:選擇2018年06月至2019年11月間,在青島大學(xué)附屬醫(yī)院保健科收集的符合本研究納入標(biāo)準(zhǔn)的中老年吸煙和非吸煙人群共130例。根據(jù)尼古丁依賴檢驗(yàn)量表(FTND)得分進(jìn)行分組:尼古丁依賴組及對照組。應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性分析技術(shù)(PCR-RFLP)和DNA直接測序兩種方法共同對5-HT2AR基因的rs6311位點(diǎn)進(jìn)行基因多態(tài)性的檢測。5-HT2AR基因rs6311位點(diǎn)的基因多態(tài)性采用Primer3軟件進(jìn)行在線分析。采用SPSS 26.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。應(yīng)用Shapiro-Wilk’s進(jìn)行正態(tài)檢驗(yàn),計數(shù)資料以例數(shù)和百分比表示;計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,計量資料兩組間比較采用t檢驗(yàn),計數(shù)資料兩組間比較采用卡方檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用spearman相關(guān)分析,P<0.05表明有統(tǒng)計學(xué)意義。第二章:采用Illumina Hiseq平臺,以2×150bp的雙端測序模式進(jìn)行高通量測序,對所有研究對象的基因組甲基化水平進(jìn)行檢測。檢...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一部分 5-HT2AR基因多態(tài)性與尼古丁依賴
    研究對象與方法
        1 研究對象
        2 研究方法
            2.1 尼古丁依賴的測量
            2.2 主要設(shè)備
            2.3 主要試劑
            2.4 標(biāo)本采集
            2.5 DNA提取
            2.6 PCR擴(kuò)增
            2.7 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳
            2.8 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的酶切和測序
            2.9 統(tǒng)計分析
    結(jié)果
        1 尼古丁依賴組和對照組臨床資料比較
        2 5-HT2AR基因多態(tài)性分析
    討論
第二部分 5-HT2AR基因啟動子區(qū)甲基化與尼古丁依賴
    研究對象與方法
        1 研究對象
        2 研究方法
            2.1 主要設(shè)備
            2.2 主要試劑
            2.3 標(biāo)本采集
            2.4 DNA提取及樣品質(zhì)控
            2.5 引物設(shè)計與單位點(diǎn)PCR條件優(yōu)化
            2.6 多重PCR引物panel優(yōu)化
            2.7 DNA的重亞硫酸鹽處理及多重PCR反應(yīng)
            2.8 定量及測序
            2.9 統(tǒng)計分析
    結(jié)果
        1 5-HT2AR基因甲基化狀態(tài)與尼古丁依賴相關(guān)性分析
            1.1 5-HT2AR基因片段甲基化差異性分析
            1.2 5-HT2AR甲基化位點(diǎn)差異性分析
        2 5-HT2AR基因多態(tài)性與啟動子區(qū)甲基化水平的相關(guān)性
    討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的科研成果
附錄
致謝



本文編號：3770341