背景:額顳葉癡呆(Frontotemporal disease,FTD)是一種常染色體顯性遺傳的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,臨床上以隱匿起病、逐漸進(jìn)展的精神行為異常,執(zhí)行功能損害和(或)語(yǔ)言障礙為特征。FTD也是僅次于阿爾茨海默病(Alzheimer disease,AD)的第二常見的早發(fā)性癡呆。根據(jù)典型的臨床表現(xiàn)可分為行為變異型額顳葉癡呆(bv FTD),語(yǔ)義性癡呆(SD)和進(jìn)行性非流利性失語(yǔ)(PNFA)三種臨床類型。多達(dá)15%的FTD患者合并運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病。約40%的FTD患者具有確切的陽(yáng)性癡呆家族史,但僅有10%的患者具有明確的常染色體顯性遺傳模式。目前已經(jīng)證實(shí)FTD至少有8種致病基因,分別是MAPT、C9ORF72、GRN、TBK1、CHMP2B、FUS、VCP、TARDBP等。其中MAPT是最早發(fā)現(xiàn)的FTD的致病基因。迄今為止,總共在160個(gè)家系發(fā)現(xiàn)了57個(gè)MAPT致病變異。而我國(guó)FTD患者的致病基因變異報(bào)道較少,因此有必要進(jìn)一步明確我國(guó)漢族FTD患者的致病基因變異譜,尤其是MAPT基因變異譜。目的:篩查并確認(rèn)我國(guó)FTD患者的致病基因變異,探討致病變異特點(diǎn)及其與臨床表型的關(guān)系。方法:2...

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
英文摘要
縮略詞表
引言
1 研究?jī)?nèi)容和方法
    1.1 研究對(duì)象
        1.1.1 研究對(duì)象及樣本收集
        1.1.2 病例納入標(biāo)準(zhǔn)
    1.2 主要實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        1.2.1 細(xì)胞系、菌種和質(zhì)粒
        1.2.2 主要試劑
        1.2.3 主要儀器
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.1 血液標(biāo)本采集
        1.3.2 基因組DNA抽提及濃度測(cè)定
        1.3.3 APOE基因檢測(cè)
        1.3.4 全外顯子測(cè)序流程
        1.3.5 全外顯子測(cè)序變異位點(diǎn)分析
        1.3.6 全外顯子測(cè)序變異位點(diǎn)Sanger測(cè)序和家系成員一代驗(yàn)證
        1.3.7 定點(diǎn)誘變構(gòu)建突變型MAPT表達(dá)質(zhì)粒
        1.3.8 去內(nèi)毒素質(zhì)粒中量抽提
        1.3.9 HEK293T和 PC12 細(xì)胞系培養(yǎng)
        1.3.10 細(xì)胞質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        1.3.11 蛋白印記實(shí)驗(yàn)(Western blot)
        1.3.12 細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)
        1.3.13 重組蛋白表達(dá)與純化實(shí)驗(yàn)流程
        1.3.14 白細(xì)胞RNA提取與逆轉(zhuǎn)錄
        1.3.15 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 入組病人臨床特點(diǎn)
    2.2 全外顯子測(cè)序變異位點(diǎn)結(jié)果分析
    2.3 攜帶MAPT和 GRN變異病人的臨床特征
    2.4 東亞人群報(bào)道的MAPT基因致病性質(zhì)不明的變異
    2.5 MAPT基因新變異對(duì)Tau蛋白磷酸化水平的影響
    2.6 Tau蛋白磷酸化表現(xiàn)為特定位點(diǎn)的改變
    2.7 p.R406Q和 p.D430H變異不影響tau與微管結(jié)合
    2.8 MAPT變異對(duì)微管組裝的影響
    2.9 MAPT變異對(duì)肝素鈉誘導(dǎo)tau蛋白自身聚集的影響
    2.10 GRN基因外顯子跳躍及m RNA水平
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 MAPT基因變異和相關(guān)神經(jīng)變性病的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3763099