1,5二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(1,5 ribulose bisphosphate carboxylase/oxygenase, Rubisco)為綠色植物光合碳同化的關(guān)鍵酶,其結(jié)構(gòu)上的小亞基(Rubisco small subuni, RbcS)影響著Rubisco全酶的功能。本實驗以玉米(Zea mays)自交系B73為材料,首先對葉片進行DNA和RNA的提取,擴增ZmRbcS1基因(GenBank No. 542212)的啟動子序列并進行結(jié)構(gòu)分析,同時對該基因的ORF進行擴增及載體構(gòu)建,并進行亞細胞定位;通過PlantCARE數(shù)據(jù)庫對啟動子進行分析,發(fā)現(xiàn)該啟動子序列上除大量保守光調(diào)控元件外(如G-box、GATA-motif、I-box、RbcS-CMA7c等),還含有多種應答干旱、激素等逆境因子的保守順式作用元件(如干旱誘導響應元件(drought-induced response element, MBS)、赤霉素響應元件(gibberellinresponsive element, P-box)、茉莉酸響應元件(jasmonic acid response element...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料和菌種
    1.2 總RNA提取、c DNA合成、基因克隆及亞細胞定位
    1.3 DNA的提取及Zm Rbc S1啟動子擴增
    1.4 序列分析
    1.5 載體的構(gòu)建及農(nóng)桿菌介導的轉(zhuǎn)化
    1.6 GUS染色及活性分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 玉米Zm Rbc S1基因亞細胞定位載體的構(gòu)建和鑒定
    2.2 轉(zhuǎn)基因煙草葉片的激光共聚焦顯微鏡觀察
    2.3 Zm Rbc S1基因啟動子的分離及序列分析
    2.4 植物表達載體的構(gòu)建
    2.5 啟動子活性的檢測
3 討論
4 結(jié)論



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