目的研究慢病毒介導(dǎo)核心結(jié)合因子α1(cbfα1)基因感染對(duì)人牙齦成纖維細(xì)胞(hGFs)成骨特性的影響。方法構(gòu)建攜帶目的基因的慢病毒表達(dá)載體pLenti6.3-cbfα1-Ires-EGFP (pL-cbfα1)(實(shí)驗(yàn)組),通過(guò)酶切、測(cè)序驗(yàn)證其構(gòu)建成功,利用293T細(xì)胞包裝病毒,并測(cè)定病毒濃度,將病毒液感染hGFs,pLenti6.3-Ires-EGFP (pL-E)為空載體組,未被感染的正常hGFs為空白對(duì)照組,通過(guò)熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)cbfα1的mRNA的表達(dá),通過(guò)細(xì)胞免疫化學(xué)染色檢測(cè)cbfα1蛋白的表達(dá);通過(guò)熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)各組成骨相關(guān)基因骨涎蛋白(Bsp)、骨橋蛋白(Opn)、Ⅰ型膠原(ColⅠ)、骨鈣蛋白(OC)的表達(dá)。結(jié)果慢病毒表達(dá)載體能夠成功感染人牙齦成纖維細(xì)胞,并檢測(cè)到cbfα1基因mRNA、蛋白的表達(dá);實(shí)驗(yàn)組中,BSP、OPN、ColⅠ、OC的表達(dá)明顯高于對(duì)照組和空載體組(P<0.05)。結(jié)論外源性基因cbfα1能夠在人牙齦成纖維細(xì)胞中表達(dá),并促進(jìn)其向成骨細(xì)胞方向轉(zhuǎn)化,為進(jìn)一步研究該基因及種子細(xì)胞在牙周組織再生工程中的作用奠定了基礎(chǔ)。

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑和儀器
    1.2 方法
        1.2.1 重組慢病毒構(gòu)建及包裝
        1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.3 慢病毒感染hGFs
        1.2.4 hGFs外源基因cbfα1 mRNA表達(dá)
        1.2.4 細(xì)胞免疫組化
        1.2.5 hGFs骨相關(guān)基因的表達(dá)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié) 果
    2.1 慢病毒構(gòu)建及包裝
    2.2 重組慢病毒感染hGFs
    2.3 外源基因cbfα1 mRNA表達(dá)
    2.4 細(xì)胞免疫染色
    2.5 成骨相關(guān)基因的表達(dá)
3 討 論



本文編號(hào)：3744976