AaPIF3是藥用植物黃花蒿（Artemisia annua）中正調(diào)控青蒿素生物合成的一個(gè)bHLH轉(zhuǎn)錄因子,但其具體的調(diào)控機(jī)制并不清楚.綜合采用分子生物學(xué)和生物化學(xué)方法研究AaPIF3調(diào)控青蒿素生物合成的機(jī)制,采用酵母單雜交（Yeast One-hybrid）技術(shù)研究AaPIF3與青蒿素生物合成途徑中4個(gè)基因（ADS,CYP71AV1,DBR2和ALDH1）和AaERF1啟動(dòng)子的相互作用;采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)AaERF1的表達(dá)量;采用雙熒光素酶（Dual-Luciferase）技術(shù)研究AaPIF3對(duì)AaERF1的轉(zhuǎn)錄激活作用.結(jié)果表明, AaPIF3均不能與青蒿素生物合成途徑中4個(gè)基因啟動(dòng)子中的順式作用元件結(jié)合,但能與AaERF1啟動(dòng)子結(jié)合;過(guò)表達(dá)AaPIF3的青蒿中AaERF1的表達(dá)量為野生型對(duì)照的3.34～6.30倍;雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)表明, AaPIF3能顯著提高AaERF1啟動(dòng)子活性,為對(duì)照的1.67倍.得出AaPIF3對(duì)青蒿素生物合成的調(diào)控是屬于間接調(diào)控,其具體調(diào)控機(jī)制為AaPIF3通過(guò)直接轉(zhuǎn)錄激活A(yù)aERF1而參與青蒿素生物合成的調(diào)控. 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 質(zhì)粒與菌株
    1.3 方 法
        1.3.1 酵母單雜交實(shí)驗(yàn)
        1.3.2 雙熒光素酶檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
2 結(jié)果與分析
    2.1 AaPIF3不能結(jié)合青蒿素生物合成基因啟動(dòng)子
    2.2 AaPIF3能夠轉(zhuǎn)錄激活A(yù)aERF1
    2.3 AaPIF3能夠結(jié)合AaERF1啟動(dòng)子
3 討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]深綠木霉對(duì)青蒿的促生作用[J]. 伍曉麗,譚均,崔廣林,劉飛,李隆云.  西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019(07)
[2]核桃JrEFM1轉(zhuǎn)錄因子響應(yīng)逆境及激素的表達(dá)模式[J]. 馬凱恒,李子儀,李大培,楊玉婷,陳淑雯,楊桂燕.  西南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019(06)



本文編號(hào)：3724140