目的探討移植膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF）基因修飾的神經(jīng)干細(xì)胞（neural stem cells,NSCs）對(duì)暫時(shí)性缺血性腦卒中大鼠的神經(jīng)保護(hù)。方法用GDNF重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染新生大鼠NSCs（GDNF/NSCs）,分化培養(yǎng)7 d后,行免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)微管相關(guān)蛋白2（MAP2）。采用改良的插線法制作暫時(shí)性腦缺血再灌注模型,3 d后經(jīng)腦室分別移植生理鹽水、NSCs和GDNF/NSCs。于再灌注后1、2、3、5、7周末處死大鼠,行免疫組織化學(xué)染色觀察移植細(xì)胞在腦內(nèi)的神經(jīng)元分化及星形膠質(zhì)細(xì)胞在缺血區(qū)形成膠質(zhì)界膜情況,行Luxol fast blue（LFB）染色顯示神經(jīng)纖維損傷情況。結(jié)果 GDNF/NSCs體外分化為MAP2⁺細(xì)胞的比例顯著高于NSCs的分化。移植細(xì)胞在腦內(nèi)分化為MAP2⁺細(xì)胞,于再灌注第5周分化達(dá)高峰,GDNF/NSCs組于再灌注第3～7周,其MAP2⁺細(xì)胞顯著高于NSCs組。各組缺血區(qū)由星形膠質(zhì)細(xì)胞形成的血管... 

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 動(dòng)物來源及主要試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 NSCs的體外培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染及分化
        1.2.2 制備暫時(shí)性大腦中動(dòng)脈缺血模型及細(xì)胞移植模型制備和細(xì)胞移植見前期文獻(xiàn)[2]
        1.2.3 免疫組織化學(xué)雙標(biāo)染色觀察移植細(xì)胞在腦內(nèi)的神經(jīng)元分化
        1.2.4 免疫組織化學(xué)染色
        1.2.5 Luxol fast blue(LFB）染色
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 NSCs和GDNF/NSCs體外分化為神經(jīng)元
    2.2 移植的NSCs和GDNF/NSCs在腦內(nèi)分化為神經(jīng)元
    2.3 NSCs和GDNF/NSCs移植后改善神經(jīng)纖維損傷
    2.4 NSCs和GDNF/NSCs移植對(duì)膠質(zhì)界膜的修復(fù)
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