GDNF基因修飾的NSCs移植對暫時性缺血性腦卒中大鼠的神經(jīng)保護作用研究
發(fā)布時間:2022-12-05 01:13
目的探討移植膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)基因修飾的神經(jīng)干細胞(neural stem cells,NSCs)對暫時性缺血性腦卒中大鼠的神經(jīng)保護。方法用GDNF重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染新生大鼠NSCs(GDNF/NSCs),分化培養(yǎng)7 d后,行免疫細胞化學染色檢測微管相關蛋白2(MAP2)。采用改良的插線法制作暫時性腦缺血再灌注模型,3 d后經(jīng)腦室分別移植生理鹽水、NSCs和GDNF/NSCs。于再灌注后1、2、3、5、7周末處死大鼠,行免疫組織化學染色觀察移植細胞在腦內(nèi)的神經(jīng)元分化及星形膠質(zhì)細胞在缺血區(qū)形成膠質(zhì)界膜情況,行Luxol fast blue(LFB)染色顯示神經(jīng)纖維損傷情況。結果 GDNF/NSCs體外分化為MAP2+細胞的比例顯著高于NSCs的分化。移植細胞在腦內(nèi)分化為MAP2+細胞,于再灌注第5周分化達高峰,GDNF/NSCs組于再灌注第3~7周,其MAP2+細胞顯著高于NSCs組。各組缺血區(qū)由星形膠質(zhì)細胞形成的血管...
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 動物來源及主要試劑
1.2 實驗方法
1.2.1 NSCs的體外培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染及分化
1.2.2 制備暫時性大腦中動脈缺血模型及細胞移植模型制備和細胞移植見前期文獻[2]
1.2.3 免疫組織化學雙標染色觀察移植細胞在腦內(nèi)的神經(jīng)元分化
1.2.4 免疫組織化學染色
1.2.5 Luxol fast blue(LFB)染色
1.3 統(tǒng)計學分析
2 結果
2.1 NSCs和GDNF/NSCs體外分化為神經(jīng)元
2.2 移植的NSCs和GDNF/NSCs在腦內(nèi)分化為神經(jīng)元
2.3 NSCs和GDNF/NSCs移植后改善神經(jīng)纖維損傷
2.4 NSCs和GDNF/NSCs移植對膠質(zhì)界膜的修復
3 討論
本文編號:3709369
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【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 動物來源及主要試劑
1.2 實驗方法
1.2.1 NSCs的體外培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染及分化
1.2.2 制備暫時性大腦中動脈缺血模型及細胞移植模型制備和細胞移植見前期文獻[2]
1.2.3 免疫組織化學雙標染色觀察移植細胞在腦內(nèi)的神經(jīng)元分化
1.2.4 免疫組織化學染色
1.2.5 Luxol fast blue(LFB)染色
1.3 統(tǒng)計學分析
2 結果
2.1 NSCs和GDNF/NSCs體外分化為神經(jīng)元
2.2 移植的NSCs和GDNF/NSCs在腦內(nèi)分化為神經(jīng)元
2.3 NSCs和GDNF/NSCs移植后改善神經(jīng)纖維損傷
2.4 NSCs和GDNF/NSCs移植對膠質(zhì)界膜的修復
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