目的:研究消化內(nèi)鏡銅綠假單胞菌生物膜對(duì)鄰苯二甲醛、戊二醛和過氧乙酸等臨床常用高水平消毒劑的抗性和抗性率,并探討其與耐消毒劑基因qac E△1-sul1之間的相關(guān)性。方法:1.銅綠假單胞菌生物膜的建立將內(nèi)鏡Teflon管道與硅膠返回管、儲(chǔ)液瓶、蠕動(dòng)泵相連,共同形成一個(gè)密閉式循環(huán)系統(tǒng)進(jìn)行灌注。2.生物膜活菌計(jì)數(shù)及觀察將銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 27853菌懸液連續(xù)灌注至Teflon管道內(nèi),分別在灌注的第2天、第4天和第6天后采用超聲振蕩法和渦旋振蕩法對(duì)Teflon管上形成的生物膜進(jìn)行分離,再取1 m L經(jīng)梯度稀釋后菌懸液接種至營(yíng)養(yǎng)平板中,計(jì)算其在不同培養(yǎng)天數(shù)下細(xì)菌菌落數(shù)。對(duì)不同培養(yǎng)天數(shù)下生物膜進(jìn)行電鏡掃描觀察,最終確定生物膜最佳生長(zhǎng)天數(shù)。3.試驗(yàn)菌株生物膜對(duì)三種消毒劑的抗性及抗性率采用最小抑菌濃度試驗(yàn)和最小殺菌濃度試驗(yàn)分別檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 27853生物膜與22株試驗(yàn)菌株生物膜對(duì)三種消毒劑的抗性及抗性率。4.耐消毒劑基因qacE△1-sul1聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)對(duì)22株試驗(yàn)菌株分別進(jìn)行qac E△1-sul1基因檢測(cè),分析qac E△1-sul1基因與三種消毒劑... 

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
    1.1 研究背景
        1.1.1 生物膜對(duì)內(nèi)鏡感染暴發(fā)的影響
        1.1.2 銅綠假單胞菌生物膜的形成
        1.1.3 銅綠假單胞菌生物膜對(duì)高水平消毒劑抗性的研究現(xiàn)狀
    1.2 消毒劑基因的研究現(xiàn)狀
    1.3 研究目的及意義
    1.4 研究技術(shù)路線圖
第2章 銅綠假單胞菌生物膜的建立
    2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 Teflon管制備
        2.2.2 菌懸液制備
        2.2.3 建立密閉式循環(huán)灌注系統(tǒng)
        2.2.4 內(nèi)鏡生物膜的形成
        2.2.5 生物膜活菌計(jì)數(shù)
        2.2.6 生物膜表面電子顯微鏡掃描觀察
        2.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 不同培養(yǎng)時(shí)間下生物膜平均菌落計(jì)數(shù)
        2.3.2 不同培養(yǎng)時(shí)間下電鏡掃描形態(tài)(×6000 倍)
        2.3.3 確定銅綠假單胞菌生物膜最佳生長(zhǎng)日期
第3章 銅綠假單胞菌生物膜對(duì)消毒劑的抗性
    3.1 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1.1 儀器與設(shè)備
        3.1.2 細(xì)菌分離鑒定
        3.1.3 中和劑鑒定實(shí)驗(yàn)
        3.1.4 最小抑菌濃度試驗(yàn)
        3.1.5 最小殺菌濃度試驗(yàn)
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 中和劑結(jié)果
        3.2.2 MIC值和MBC值的試驗(yàn)結(jié)果
    3.3 抗性判定標(biāo)準(zhǔn)
        3.3.1 并聯(lián)試驗(yàn)抗性結(jié)果
        3.3.2 串聯(lián)試驗(yàn)抗性結(jié)果
第4章 耐消毒劑基因qacE△1-sul1 檢測(cè)
    4.1 實(shí)驗(yàn)方法
        4.1.1 儀器與設(shè)備
        4.1.2 DNA提取
        4.1.3 基因檢測(cè)
        4.1.4 擴(kuò)增體系
        4.1.5 擴(kuò)增條件
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 qacE△1-sulI基因陽性結(jié)果
        4.2.2 基因測(cè)序圖
        4.2.3 qacE△1-sul1 基因與試驗(yàn)菌株生物膜對(duì)消毒劑抗性的關(guān)系
        4.2.4 抗性組與非抗性組與qacE△1-sulI基因比較
第5章 討論
    5.1 三種消毒劑作用原理及殺菌效果分析
    5.2 試驗(yàn)菌株生物膜對(duì)三種消毒劑的抗性
    5.3 細(xì)菌生物膜與消毒劑抗性之間的關(guān)系
    5.4 試驗(yàn)菌株生物膜與消毒劑qacE△1-sul1 基因之間的關(guān)聯(lián)
    5.5 消毒劑抗性產(chǎn)生的原因及策略
第6章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 局限及展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]內(nèi)鏡清洗消毒效果評(píng)價(jià)方法研究進(jìn)展[J]. 徐燕,吳曉松,王玲.  中國(guó)消毒學(xué)雜志. 2019(05)
[2]VSD聯(lián)合不同濃度過氧乙酸對(duì)糖尿病足創(chuàng)面療效觀察[J]. 王志中,周軍利.  甘肅科技. 2019(05)
[3]鄰苯二甲醛對(duì)細(xì)菌芽孢和分枝桿菌殺滅效果研究[J]. 魏蘭芬,潘協(xié)商,趙永信,李曄,蔡冉,朱一凡.  中國(guó)消毒學(xué)雜志. 2019(01)
[4]細(xì)菌外排泵抑制劑研究進(jìn)展[J]. 孫影,顧覺奮.  藥學(xué)進(jìn)展. 2018(06)
[5]胞外DNA在銅綠假單胞菌生物膜形成中的作用機(jī)制[J]. 鄭錢梅,韋紅.  兒科藥學(xué)雜志. 2018(06)
[6]細(xì)菌對(duì)消毒劑的檢測(cè)方法與耐藥機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 吳舜,周燕.  海南醫(yī)學(xué). 2018(08)
[7]上海市90所醫(yī)院臨床病原學(xué)標(biāo)本送檢及耐藥菌檢出現(xiàn)狀分析[J]. 林佳冰,高曉東,崔揚(yáng)文,孫偉,沈燕,史慶豐,陳翔,胡必杰.  中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2018(08)
[8]清洗環(huán)節(jié)質(zhì)量控制對(duì)內(nèi)鏡管腔生物膜的影響[J]. 周冬梅,周巖巖,盧玉文.  中國(guó)消毒學(xué)雜志. 2018(02)
[9]近五年“十大醫(yī)療技術(shù)危害”對(duì)醫(yī)療器械應(yīng)用質(zhì)量管理工作的啟示[J]. 鄭小溪,夏凡,劉倪,姜天,王威.  中國(guó)醫(yī)療器械雜志. 2018(01)
[10]細(xì)菌主要外排泵及其調(diào)控蛋白研究進(jìn)展[J]. 高海嬌,程古月,王玉蓮,寧佳囡,陳婷,李俊,郝海紅,袁宗輝.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(11)

碩士論文
[1]銅綠假單胞菌PA1797基因相關(guān)功能的研究[D]. 黃加銘.福建醫(yī)科大學(xué) 2014
[2]不同清洗劑及其不同作用時(shí)間對(duì)內(nèi)鏡生物膜清除的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 任偉.南方醫(yī)科大學(xué) 2011
[3]銅綠假單胞菌對(duì)鄰苯二甲醛與碘伏抗性及其機(jī)制研究[D]. 林丹.福建醫(yī)科大學(xué) 2009
[4]復(fù)方鄰苯二甲醛殺滅醫(yī)院感染菌效果及其殺菌機(jī)理研究[D]. 李曉娜.福建醫(yī)科大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3709357