20世紀(jì)60年代,綠色革命基因sd1和Rht1的發(fā)掘?qū)τ谌蜃魑锇N具有重要的推動(dòng)作用。玉米br2基因能有效降低株高,已在育種中成功應(yīng)用。因此,發(fā)掘新的玉米矮稈資源,對(duì)玉米矮化育種具有重要意義。本課題組發(fā)現(xiàn)2份玉米矮稈突變體K15d和K78d,前期研究表明均具有矮稈高產(chǎn)育種潛力,其矮稈基因d15和d78與br2等位。本研究對(duì)2個(gè)矮稈基因進(jìn)行克隆和表達(dá)分析,為進(jìn)一步研究其矮化機(jī)制和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1、參考Br2基因序列設(shè)計(jì)7對(duì)特異性引物,利用PCR技術(shù)對(duì)d15基因分段擴(kuò)增,測(cè)序后經(jīng)DNAMAN軟件拼接發(fā)現(xiàn),d15基因由5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子組成,其中第五外顯子5485bp到5685bp間缺失200bp,編碼區(qū)全長(zhǎng)3983bp,編碼1326個(gè)氨基酸,是一個(gè)新的br2等位基因。生物信息學(xué)分析表明,與野生型K15比較,突變體K15d中d15編碼蛋白只有10個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,缺失了2個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,并且二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,第二個(gè)保守功能域NBD缺失,影響了底物的結(jié)合和轉(zhuǎn)運(yùn)功能。d15啟動(dòng)子序列為1091bp,該區(qū)域含有光響應(yīng)、激素響應(yīng)及脅迫誘導(dǎo)等相關(guān)順式作用元件,與Br2僅有2個(gè)SN... 

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮寫對(duì)照
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 作物矮稈基因研究進(jìn)展
    1.2 玉米br2基因的研究與應(yīng)用
        1.2.1 玉米br2基因的研究
        1.2.2 玉米br2基因的應(yīng)用
    1.3 植物矮化機(jī)理研究
        1.3.1 赤霉素生物合成途徑與株高調(diào)控
        1.3.2 生長(zhǎng)素極性運(yùn)輸?shù)恼{(diào)控
    1.4 植物啟動(dòng)子的研究
        1.4.1 植物啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)及特征
        1.4.2 啟動(dòng)子區(qū)突變的研究進(jìn)展
    1.5 植物基因克隆的方法
        1.5.1 同源克隆
        1.5.2 圖位克隆
        1.5.3 轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽克隆
        1.5.4 表型克隆
    1.6 研究?jī)?nèi)容及目的意義
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料和主要試劑
        2.1.1 供試材料
        2.1.2 主要試劑及儀器
        2.1.3 相關(guān)試劑的配制
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 基因同源克隆
        2.2.2 生物信息學(xué)分析
        2.2.3 基因表達(dá)分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 基因克隆及序列比對(duì)
        3.1.1 矮稈基因d15
        3.1.2 矮稈基因d78
    3.2 生物信息學(xué)預(yù)測(cè)分析
        3.2.1 d15基因的預(yù)測(cè)
        3.2.2 d78基因的預(yù)測(cè)
    3.3 基因表達(dá)分析
        3.3.1 總RNA濃度與純度檢測(cè)
        3.3.2 d15基因的表達(dá)
        3.3.3 d78基因的表達(dá)
4 討論與結(jié)論
    4.1 d15和d78基因的序列比較
    4.2 d15和d78基因的功能分析
    4.3 d15和d78基因的表達(dá)分析
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[7]多肽TAP親和活性預(yù)測(cè)與分子模擬研究[D]. 潘顯超.重慶大學(xué) 2013
[8]新型特矮稻基因定位和赤霉素代謝關(guān)鍵酶基因表達(dá)分析[D]. 梅進(jìn).湖南大學(xué) 2009
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