目的:膽管癌是最具侵襲性的惡性腫瘤之一,由于其早期侵襲性特征和對化學(xué)療法或放射療法的反應(yīng)差,導(dǎo)致其預(yù)后不良。越來越多的證據(jù)表明異常表達的肌動蛋白樣6A（actin like 6A,ACTL6A）參與癌癥的發(fā)生和發(fā)展。然而,它在膽管癌中的臨床價值和生物學(xué)作用仍不清楚。我們初步研究發(fā)現(xiàn),ACTL6A在膽管癌組織中異常表達。因此,我們推測ACTL6A的異常表達可能與膽管癌的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。本研究旨在探討ACTL6A在膽管癌發(fā)生和發(fā)展中的生物學(xué)作用及潛在機制。方法:首先我們通過蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測ACTL6A在膽管癌中的表達。然后應(yīng)用RNA干擾（RNA interference,RNAi）技術(shù)將小干擾RNA（small interfering RNA,siRNA）經(jīng)脂質(zhì)體介導(dǎo)并轉(zhuǎn)染至膽管癌QBC939細胞中,并將該實驗分為陰性對照組（siRNA-NC）和沉默組（siRNA-ACTL6A）,采用實時熒光定量PCR（Real-Time PCR,RT-PCR）以及Western blot評估了siRNA轉(zhuǎn)染后的沉默效率。采用CCK-8法和克隆形成實驗檢測細胞的增殖情況;劃痕... 

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料與方法
    1 實驗材料
        1.1 細胞和組織
        1.2 主要試劑和實驗耗材
        1.3 主要儀器
    2 實驗方法
        2.1 主要試劑的配制
        2.2 Western blot檢測組織中蛋白的表達
        2.3 細胞培養(yǎng)
        2.4 RNA干擾技術(shù)
        2.5 Real-Time PCR檢測細胞中mRNA的表達
        2.6 Western blot檢測細胞中蛋白的表達
        2.7 細胞活性檢測(CCK-8 法)
        2.8 克隆形成實驗
        2.9 劃痕實驗
        2.10 Transwell遷移和侵襲實驗
        2.11 統(tǒng)計學(xué)處理
實驗結(jié)果
    1 ACTL6A在膽管癌組織中異常表達
    2 siRNA轉(zhuǎn)染效率的驗證
    3 沉默ACTL6A對膽管癌QBC939 細胞增殖的抑制作用
    4 沉默ACTL6A對膽管癌QBC939 細胞遷移和侵襲的影響
    5 沉默ACTL6A對 EMT的影響
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表（附錄）
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Clinicopathologic significance of slug expression in human intrahepatic cholangiocarcinoma[J]. Ke-Jun Zhang,Bing-Yuan Zhang,Kun-Peng Zhang,ShiSong Liu,Dian-Liang Zhang,Second Department of General Surgery,Affiliated Hospital of Qingdao Medical College,Qingdao University,Qingdao 266003,Shandong Province,China Li-Min Tang,Department of Radiology,Affiliated Hospital of Qingdao Medical College,Qingdao University,Qingdao 266003,Shandong Province,China Dong-Ming Zhu,Department of General Surgery,First Affiliated Hospital of Suzhou University,Suzhou 215006,Jiangsu Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2010(20)



本文編號：3687792