【目的】明確沉默稻縱卷葉螟膜結(jié)合型海藻糖酶基因（CmTre2）對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育的影響,為稻縱卷葉螟的防治奠定理論基礎(chǔ)�！痉椒ā炕赗NA干擾（RNA interference,RNAi）技術(shù),針對(duì)稻縱卷葉螟膜結(jié)合型海藻糖酶基因（CmTre2）設(shè)計(jì)靶位點(diǎn),體外合成雙鏈RNA（dsCmTre2）,將其注射入稻縱卷葉螟3齡幼蟲(chóng)體內(nèi),觀察試蟲(chóng)表型變化,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-qPCR）檢測(cè)CmTre2的表達(dá)水平,測(cè)定酶活力�！窘Y(jié)果】注射dsCmTre2的幼蟲(chóng)取食量明顯下降,生長(zhǎng)發(fā)育阻滯,體型變小,出現(xiàn)畸形和死亡現(xiàn)象。注射dsCmTre2后5 d,幼蟲(chóng)死亡率明顯高于對(duì)照組,存活幼蟲(chóng)體重明顯輕于對(duì)照組;CmTre2和幾丁質(zhì)合成酶B基因（CmCHSB）的表達(dá)量較對(duì)照分別下降53.70%和34.41%;膜結(jié)合型海藻糖酶活力較對(duì)照組下降35.61%�！窘Y(jié)論】CmTre2基因?qū)Φ究v卷葉螟的生長(zhǎng)發(fā)育具有重要作用,該基因的沉默影響幾丁質(zhì)合成,引起發(fā)育障礙。該研究結(jié)果為進(jìn)一步利用RNAi技術(shù)在田間防治稻縱卷葉螟奠定了基礎(chǔ)。 

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 靶位點(diǎn)的設(shè)計(jì)
        1.2.2 引物設(shè)計(jì)
        1.2.3 dsRNA的合成與注射
        1.2.4 沉默CmTre2及其對(duì)幾丁質(zhì)合成酶基因的影響
        1.2.5 海藻糖酶活性測(cè)定
    1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 靶基因CmTre2的沉默效應(yīng)
    2.2 沉默CmTre2后稻縱卷葉螟的生長(zhǎng)發(fā)育
    2.3 沉默CmTre2后幾丁質(zhì)合成酶基因基因的表達(dá)
    2.4 RNA干擾海藻糖酶的活性
3 討 論
4 結(jié) 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]RNAi技術(shù)在農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)防治中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 王聰,蔡普默,張琪文,楊燕川,陳家驊.  中國(guó)植保導(dǎo)刊. 2018(06)
[2]褐飛虱海藻糖酶基因在表皮幾丁質(zhì)代謝中的調(diào)控作用[J]. 張露,朱世城,鄭好,沈祺達(dá),王世貴,唐斌.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(06)
[3]綠僵菌及其與dsRNA混合使用對(duì)褐飛虱的防治效果[J]. 潘春艷,蔡尤俊,李騰超,張文慶.  環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2016(06)
[4]飛蝗海藻糖酶基因的分子特性及功能[J]. 劉曉健,孫亞文,崔淼,馬恩波,張建珍.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(22)
[5]稻縱卷葉螟海藻糖酶基因的克隆、分子特性和表達(dá)分析[J]. 田宇,杜娟,李尚偉,李嬌,王爽.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2016(06)
[6]昆蟲(chóng)海藻糖與海藻糖酶的特性及功能研究[J]. 秦加敏,羅術(shù)東,和紹禹,吳杰.  環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2015(01)
[7]昆蟲(chóng)海藻糖酶的基因特性及功能研究進(jìn)展[J]. 唐斌,魏蘋,陳潔,王世貴,張文慶.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2012(11)
[8]灰飛虱海藻糖酶基因的克隆及RNA干擾效應(yīng)[J]. 張倩,魯鼎浩,蒲建,吳敏,韓召軍.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2012(08)
[9]昆蟲(chóng)幾丁質(zhì)合成及其調(diào)控研究前沿[J]. 張文慶,陳曉菲,唐斌,田宏剛,陳潔,姚瓊.  應(yīng)用昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2011(03)
[10]稻縱卷葉螟的為害癥狀與發(fā)生規(guī)律[J]. 鐘承茂.  農(nóng)技服務(wù). 2008(01)

碩士論文
[1]赤擬谷盜海藻糖酶基因調(diào)控幾丁質(zhì)合成及能量代謝的功能研究[D]. 魏蘋.杭州師范大學(xué) 2013
[2]飛蝗UAPs的分子特性及功能研究[D]. 李峰.山西大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3675211