目的探討多重實(shí)時(shí)PCR和測(cè)序技術(shù)用于RHC基因分型的可行性。方法隨機(jī)收集2019年11月2日—11月6日期間242名健康獻(xiàn)血者血樣。使用血清學(xué)方法檢測(cè)標(biāo)本的Rh CcEe血型表型。使用檢測(cè)RHCE基因第1外顯子48C>G多態(tài)性及第2內(nèi)含子109 bp插入序列的多重實(shí)時(shí)PCR方法對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行RHC基因分型。使用基因測(cè)序方法對(duì)以上2個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)檢測(cè)結(jié)果不一致的標(biāo)本進(jìn)行基因分型。結(jié)果經(jīng)多重實(shí)時(shí)PCR基因分型,2個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)分型結(jié)果一致者共235例（97.10%）,這些標(biāo)本的分型結(jié)果和血清學(xué)方法是完全一致的。2個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)分型結(jié)果不一致者共7例（2.90%）,其中第1外顯子48C>G多態(tài)性位點(diǎn)分型結(jié)果與血清學(xué)方法不符者共4例,假陽(yáng)性率12.5%（4/32）,而第2內(nèi)含子的109 bp插入序列分型結(jié)果與血清學(xué)方法不符者共3例,假陰性率1.43%（3/210）。對(duì)于多重實(shí)時(shí)PCR2個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)分型不一致的標(biāo)本,進(jìn)行第2外顯子測(cè)序,測(cè)序結(jié)果和血清學(xué)完全一致。結(jié)論使用檢測(cè)RHCE基因第1外顯子48C>G多態(tài)性及第2內(nèi)含子109 bp插入片段的多重實(shí)時(shí)PCR進(jìn)行RHC基因分型,若二者... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 隨機(jī)選取
    1.2 儀器及試劑
    1.3 血清學(xué)方法
    1.4 DNA的提取
    1.5 引物及探針設(shè)計(jì)及合成
    1.6 多重實(shí)時(shí)PCR
    1.7 RHCE基因第2外顯子測(cè)序分析
2 結(jié)果
    2.1 血清學(xué)分型結(jié)果
    2.2 多重實(shí)時(shí)PCR基因分型結(jié)果
    2.3 RHCE基因分型結(jié)果與血清學(xué)分型結(jié)果比較
    2.4 RHCE基因第2外顯子基因測(cè)序結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]簡(jiǎn)易R(shí)HCE基因定型方法用于Rh配型輸血的可行性探討[J]. 黨鑫堂,伍昌林,徐華,李嵐,朱奕,吳筱瑩,張印則,易品,余志英,邵超鵬.  中國(guó)輸血雜志. 2018(11)
[2]46346名患者不規(guī)則抗體篩查結(jié)果及分析[J]. 王鈺箐,蔡曉紅,龔淞頌,鄒緯,劉志剛,王勤,沙青,沈敏,葉瑾,王學(xué)鋒.  中國(guó)輸血雜志. 2015(08)
[3]中國(guó)南方漢族和西藏藏族RHCE基因109bp插入序列和733C>G多態(tài)性研究[J]. 石文,李慧,張印則,李曉娟,劉持翔,斯郎則仁,余明明,王淑紅,閆清雅,徐華,周華友.  中國(guó)輸血雜志. 2013(10)
[4]RhCE抗原基因分型和表型不一致與等位基因變異的相關(guān)性研究[J]. 王志紅,蘭炯采.  中國(guó)輸血雜志. 2012(11)
[5]RHCE基因結(jié)構(gòu)研究[J]. 蘭炯采,周華友,龐桂芝,楊全科,吳燦.  中國(guó)輸血雜志. 2005(05)



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