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斑節(jié)對蝦MKK7基因的克隆及在不同脅迫條件下的表達(dá)分析

發(fā)布時間:2022-07-15 12:53
  絲裂原活化蛋白激酶激酶7 (MKK7)是JNK (c-Jun N-terminal kinase)信號通路的關(guān)鍵調(diào)控因子,參與調(diào)節(jié)細(xì)胞對各種胞外刺激的反應(yīng)。本研究利用RACE技術(shù)克隆獲得了斑節(jié)對蝦(Penaeus monodon) MKK7基因(PmMKK7),其全長為2710 bp,包括14 bp的5’ 非編碼區(qū)(UTR)、1295 bp的3’ UTR和1401 bp的開放閱讀框(open reading frame,ORF),編碼466個氨基酸。多重序列比對和系統(tǒng)進(jìn)化樹分析結(jié)果表明,PmMKK7與凡納濱對蝦(Litopenaeusvannamei) MKK7基因聚為一支并且具有最高的同源性(99.14%)。定量表達(dá)結(jié)果表明, PmMKK7基因在斑節(jié)對蝦的各個組織中都有表達(dá),其中在肌肉中表達(dá)最高,在胃中表達(dá)最低。菌注射實驗后,感染金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)組和鰻弧菌(Vibrioanguillarum)組在肝胰腺和鰓組織中均顯著高于對照組(P<0.05);感染哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)組,這兩種組織中的表達(dá)量均顯著低于對照組。兩... 

【文章頁數(shù)】:11 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 總RNA的提取及cDNA的合成
    1.3 斑節(jié)對蝦MKK7的cDNA克隆
    1.4 生物信息學(xué)分析
    1.5 PmMKK7的表達(dá)分析
    1.6 病原體感染實驗
    1.7 鹽度脅迫實驗
    1.8 RNA干擾實驗
2 結(jié)果與分析
    2.1 PmMKK7的序列分析
    2.2 PmMKK7在不同組織中的表達(dá)
    2.3 PmMKK7在菌刺激下的表達(dá)變化
    2.4 PmMKK7在鹽度脅迫下的表達(dá)變化
    2.5 PmMKK7基因敲降后的相關(guān)表達(dá)分析
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]斑節(jié)對蝦GLUT1基因cDNA的克隆與表達(dá)分析[J]. 何鵬,江世貴,李運(yùn)東,楊其彬,姜松,楊麗詩,黃建華,周發(fā)林.  南方水產(chǎn)科學(xué). 2019(02)
[2]JNK1基因在金魚性腺不同發(fā)育時期的表達(dá)分析[J]. 鄒立軍,黃文,莊遠(yuǎn)紅,廖海艷,吉璐.  生物學(xué)雜志. 2017(04)
[3]鹽度對斑節(jié)對蝦蛻殼、存活、生長和飼料轉(zhuǎn)化率的影響[J]. 楊其彬,葉樂,溫為庚,王雨,江世貴.  南方水產(chǎn). 2008(01)



本文編號:3662084

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