長(zhǎng)爪沙鼠作為一種待開(kāi)發(fā)的―多功能‖實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,具有廣泛應(yīng)用前景。國(guó)內(nèi)外學(xué)者利用長(zhǎng)爪沙鼠特殊的生物特性建立了多種人類疾病動(dòng)物模型。為了研究諸多疾病的發(fā)生、發(fā)展、治療和轉(zhuǎn)歸機(jī)制需要各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,但目前長(zhǎng)爪沙鼠尚未建立轉(zhuǎn)基因及基因敲除/敲減等動(dòng)物模型。本實(shí)驗(yàn)利用一種新型的應(yīng)用廣泛的方便快捷的方法—CRISPR/Cas9技術(shù)在長(zhǎng)爪沙鼠上進(jìn)行轉(zhuǎn)基因方法探索,為長(zhǎng)爪沙鼠動(dòng)物模型研究和相關(guān)基因功能奠定技術(shù)基礎(chǔ)。原核生物中CRISPR-Cas編碼的是一種適應(yīng)性免疫系統(tǒng)用來(lái)抵御感染的病毒和質(zhì)粒。免疫是由Cas核酸,通過(guò)小型RNA介導(dǎo)（crRNAs）其酶切入侵的核酸的基因組內(nèi)特定酶切解位點(diǎn)。在II型CRISPR-Cas系統(tǒng)中,DNA切割活性通過(guò)由RNA引導(dǎo)單一酶Cas9進(jìn)行。使用合成單個(gè)引導(dǎo)RNA（gRNA）,Cas9可以重新編程中的各種生物的基因組以創(chuàng)建特定雙鏈DNA斷裂,幾乎在所以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中,都可以構(gòu)成用于遺傳工程的有力工具。動(dòng)物克隆和轉(zhuǎn)基因等胚胎生物技術(shù)需要超數(shù)排卵提供足夠數(shù)量的卵與胚胎,因此超數(shù)排卵對(duì)動(dòng)物胚胎生物技術(shù)研究具有重要意義。為了得到長(zhǎng)爪沙鼠最佳的超數(shù)排卵方案,我們通過(guò)對(duì)長(zhǎng)爪沙鼠使用時(shí)周... 

【文章頁(yè)數(shù)】：86 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 PMSG和hCG誘導(dǎo)的長(zhǎng)爪沙鼠超數(shù)排卵方案的優(yōu)化
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第二部分 gRNA的設(shè)計(jì)及篩選
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第三部分 長(zhǎng)爪沙鼠CRISPR/Cas9基因敲除方法的初步建立
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間文章發(fā)表情況
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3656969