利用生物信息學(xué)技術(shù)結(jié)合基于大腸桿菌的堿性磷酸酯酶（PhoA）檢測體系,在梨火疫病菌（Erwinia amylovora）全基因組序列中篩選鑒定了2個依賴Sec途徑分泌的纖維素酶:內(nèi)切葡聚糖酶EAMY₃602和β-葡萄糖苷酶EAMY₁236。將梨火疫病菌DSM17948接種酥梨幼果,分別于接種后0、8和24 h定量檢測基因表達(dá),結(jié)果顯示EAMY₃602編碼基因（Ea3602）在接種后8和24 h的mRNA表達(dá)量逐漸降低,但與0 h相比無顯著差異;EAMY₁236編碼基因（Ea1236）在接種后8和24 h的mRNA表達(dá)量逐步提高,較0 h分別提高了2.43和3.26倍,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。由研究結(jié)果推測Sec依賴分泌的內(nèi)切葡聚糖酶EAMY₃602可能與梨火疫病菌侵染無關(guān),而β-葡萄糖苷酶EAMY₁236可能是梨火疫病菌的毒力因子,在侵染寄主植物過程中發(fā)揮作用。 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 方法
        1.2.1 生物信息學(xué)分析
        1.2.2 基因克隆
        1.2.3 PhoA檢測
        1.2.4 接種梨幼果
        1.2.5 總RNA提取與RT-qPCR分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 篩選梨火疫病菌Sec依賴分泌纖維素酶
    2.2 克隆Ea3602和Ea1236基因
    2.3 驗(yàn)證EAMY_3602和EAMY_1236的分泌特性
    2.4 Ea3602和Ea1236在梨火疫病菌侵染幼梨過程中的表達(dá)分析
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]柑桔潰瘍病菌（Xanthomonas axonopodis pv.citri）纖維素酶的分析[D]. 李永勝.西南大學(xué) 2011



本文編號：3655038