胭脂魚（Myxocyprinus asiaticus）屬鯉形目（Cypriniformes）胭脂魚科（Catostomidae）,僅分布于我國長江和閩江,是我國特有的淡水珍稀物種。胭脂魚體型奇特、色彩絢麗、味道鮮美,具有很高的觀賞和食用價值。胭脂魚是我國長江流域的重要經(jīng)濟魚類,但是由于近些年人類活動的頻繁導致其數(shù)量驟降,其生境一度面臨著嚴峻的挑戰(zhàn),通過科學的人工繁殖放流已使得其數(shù)量得到穩(wěn)步的回升。人工繁殖成為保護胭脂魚這一種群的重要途徑。但是隨著人工養(yǎng)殖規(guī)模的擴大,其面臨的病害也隨之增加,造成較高的死亡率,這是目前胭脂魚人工養(yǎng)殖中面臨的一大困境。我們試圖從胭脂魚的免疫系統(tǒng)中的細胞因子入手,希望為解決胭脂魚人工繁殖中存在的困境提供理論依據(jù)和解決措施。細胞因子是一群相對分子量較小的蛋白,活性極高,產(chǎn)生的時間短暫,通常通過自分泌或旁分泌的形式發(fā)揮作用。細胞因子作為免疫系統(tǒng)中一類重要的傳導信號的分子,是免疫細胞間信號網(wǎng)絡的組成部分,在炎癥反應、防御病毒感染、特異性T、B細胞克隆的增殖及其功能等方面起作用。腫瘤壞死因子配體超家族在調節(jié)免疫反應中起到了關鍵作用,這些配體中的大多數(shù)是典型的Ⅱ型跨膜蛋... 

【文章來源】：西南大學重慶市211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞
摘要
Abstract
第1章 文獻綜述
    1.1 BAFF的研究進展
        1.1.1 BAFF的結構與分布
        1.1.2 BAFF的受體及信號轉導
        1.1.3 BAFF與相關疾病
        1.1.4 BAFF在魚類中的研究進展
    1.2 魚類細胞因子的研究進展
    1.3 細胞因子類藥物的研究進展
    1.4 胭脂魚的研究現(xiàn)狀
    1.5 研究的目的與意義
    1.6 研究內(nèi)容
第2章 胭脂魚BAFF基因的克隆與生物信息學分析
    2.1 引言
    2.2 實驗材料和儀器
        2.2.1 實驗動物
        2.2.2 實驗菌株
        2.2.3 實驗試劑與器材
    2.3 實驗方法
        2.3.1 脾臟總RNA的提取與cDNA的合成
        2.3.2 大腸桿菌Top10感受態(tài)細胞的制備
        2.3.3 胭脂魚BAFF分子核心序列的擴增
        2.3.4 RACE-PCR擴增3′和5′核苷酸序列
        2.3.5 胭脂魚BAFF全長拼接
        2.3.6 胭脂魚BAFF序列的生物信息學分析
    2.4 實驗結果
        2.4.1 胭脂魚BAFFcDNA全長
        2.4.2 胭脂魚BAFFcDNA生物信息學分析結果
    2.5 討論
第3章 胭脂魚BAFF表達模式研究
    3.1 引言
    3.2 實驗材料和儀器
        3.2.1 實驗動物
        3.2.2 實驗菌株
        3.2.3 實驗試劑及儀器
        3.2.4 有關試劑的配制
    3.3 實驗方法
        3.3.1 胭脂魚BAFF組織分布和發(fā)育時期檢測
        3.3.2 原位雜交分析胭脂魚外周血白細胞BAFF的表達
        3.3.3 嗜水氣單胞菌感染后對胭脂魚BAFF和IgM表達變化的影響
    3.4 實驗結果
        3.4.1 GAPDH、β-actin、L18a、18srRNA四個候選內(nèi)參基因的穩(wěn)定性評估
        3.4.2 胭脂魚BAFF組織表達分析
        3.4.3 胭脂魚BAFF早期發(fā)育階段檢測
        3.4.4 原位雜交分析胭脂魚外周白細胞BAFF表達結果
        3.4.5 嗜水氣單胞菌感染后BAFF和IgM表達變化情況
    3.5 討論
第4章 胭脂魚BAFF重組蛋白的表達、純化和功能檢測
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 實驗菌株和載體
        4.2.2 實驗試劑及儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 RT-PCR擴增MasBAFF基因及PCR產(chǎn)物的回收和鑒定
        4.3.2 重組表達質粒的構建
        4.3.3 重組蛋白的表達、純化與鑒定
        4.3.4 胭脂魚BAFF重組蛋白的功能檢測
    4.4 實驗結果
        4.4.1 SDS-PAGE分析鑒定誘導表達結果
        4.4.2 MasBAFF蛋白與胭脂魚外周血白細胞的結合
        4.4.3 MasBAFF蛋白對體外培養(yǎng)胭脂魚外周血白細胞的活性影響
    4.5 討論
全文結論
參考文獻
發(fā)表文章
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]BAFF受體TACI融合蛋白的表達純化與功能研究[D]. 孟祥斌.天津大學 2010
[3]B細胞刺激因子受體（BAFF-R）的基因克隆、表達與功能研究[D]. 田俠.河北大學 2006
[4]重組人可溶性B淋巴細胞刺激因子的制備及功能鑒定[D]. 高會廣.第三軍醫(yī)大學 2003



本文編號：3639849