梨樹具有自交不親和特性,在生產(chǎn)上花期外施赤霉素（GA）可以誘導梨單性結(jié)實同時提高坐果率,能有效解決梨自交不親和的問題,提高產(chǎn)量和經(jīng)濟價值。相對于其他植物,梨外施GA誘導單性結(jié)實的機制研究起步較晚,研究多集中于激素處理后對不同品種坐果率的數(shù)據(jù)對比,胚敗育過程觀察,以及處理后對果實品質(zhì)的影響,而對于其單性結(jié)實的機制研究關注較少。鑒于此,本研究在前期研究的基礎上,以碭山酥梨為材料,研究GA信號通路的負調(diào)控因子DELLA蛋白在單性結(jié)實過程中的功能。主要研究結(jié)果如下:1.PbDELLA基因與PbGID1基因的克隆和生物信息學分析。利用NCBI中數(shù)據(jù)庫,篩選出梨DELLA基因和GID1基因,得到有DELLA保守特征結(jié)構(gòu)域的DELLA基因4個分別命名為PbDELLA1,PbDELLA2,PbDELLA3,PbDELLA4;鑒定得到GA受體基因GID1 3個,分別命名為PbGID1b,PbGID1c1,PbGID1c2。生物信息學分析結(jié)果顯示4個DELLA蛋白有參與赤霉素信號負調(diào)控途徑的完整GRAS結(jié)構(gòu)域和DELLA結(jié)構(gòu)域,并且在氨基酸序列和理化性質(zhì)以及蛋白的三維空間結(jié)構(gòu)上具有相似特性。系統(tǒng)進化分析結(jié)... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 前言
    1.2 單性結(jié)實
        1.2.1 單性結(jié)實概述
        1.2.2 植物激素與單性結(jié)實
    1.3 赤霉素
        1.3.1 赤霉素的合成與運輸
        1.3.2 赤霉素信號轉(zhuǎn)導途徑
        1.3.3 赤霉素信號在果實坐果過程中的作用
    1.4 DELLA基因
        1.4.1 DELLA基因的基本結(jié)構(gòu)和功能
        1.4.2 DELLA基因與單性結(jié)實
    1.5 本研究的目的與意義
第二章 PbDELLA和 PbGID1 基因的克隆及生物信息學分析
    2.1 材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 載體與菌株
        2.1.3 實驗試劑及儀器設備
        2.1.4 試劑配制
    2.2 方法
        2.2.1 PbDELLA基因的克隆
        2.2.2 PbDELLA基因序列分析
        2.2.3 PbDELLA基因系統(tǒng)進化分析
        2.2.4 PbGID1 基因的克隆
        2.2.5 PbGID1 基因序列分析
        2.2.6 PbGID1 基因系統(tǒng)進化樹分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 PbDELLA基因克隆及序列分析
        2.3.2 PbDELLA基因系統(tǒng)進化分析
        2.3.3 PbGID1 基因克隆及序列分析
        2.3.4 PbGID1 基因系統(tǒng)進化分析
    2.4 討論
第三章 PbDELLA基因與PbGID1 基因亞細胞定位和互做驗證
    3.1 材料
    3.2 方法
        3.2.1 PbDELLA基因和PbGID1 基因亞細胞定位載體構(gòu)建
        3.2.2 農(nóng)桿菌介導的煙草表皮注射
        3.2.3 PbDELLA基因互作驗證載體構(gòu)建
        3.2.4 PbGID1 基因互作驗證載體構(gòu)建
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 PbDELLA基因亞細胞定位觀察
        3.3.2 PbGID1 基因亞細胞定位觀察
        3.3.3 PbDELLA基因與PbGID1 基因互作觀察
    3.4 討論
第四章 PbDELLA基因遺傳轉(zhuǎn)化
    4.1 材料
    4.2 方法
        4.2.1 PbDELLA基因遺傳轉(zhuǎn)化相關載體構(gòu)建
        4.2.2 PbDELLA基因轉(zhuǎn)化擬南芥
        4.2.3 PbDELLA基因轉(zhuǎn)基因擬南芥檢測鑒定
        4.2.4 PbDELLA基因在梨花期抽真空瞬時遺傳轉(zhuǎn)化
        4.2.5 PbDELLA基因瞬時遺傳轉(zhuǎn)化材料qRT-PCR檢測
        4.2.6 PbDELLA基因瞬時轉(zhuǎn)化材料PbARF、PbIAA基因qRT-PCR檢測
        4.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 PbDELLA基因轉(zhuǎn)基因擬南芥篩選
        4.3.2 PbDELLA基因轉(zhuǎn)基因擬南芥株系呈現(xiàn)出GA缺失型表型
        4.3.3 在梨中瞬時沉默PbDELLA基因延遲未授粉梨子房凋亡
        4.3.4 在梨中過表達PbDELLA基因?qū)е乱咽诜劾嬗坠蛲?br>        4.3.5 梨中PbDELLA基因影響PbARF、PbIAA的表達水平
    4.4 討論
第五章 結(jié)論與創(chuàng)新點
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點
參考文獻
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]不同植物生長調(diào)節(jié)劑誘導碭山酥梨單性結(jié)實研究[J]. 劉璐璐,朱春琴,張嫚,高懷懷,楊成泉,王志剛,徐凌飛.  中國南方果樹. 2017(06)
[2]植物激素對果樹單性結(jié)實調(diào)控的研究進展[J]. 王西成,王晨,房經(jīng)貴,上官凌飛,劉洪,韓鍵.  植物生理學報. 2012(07)
[3]梨自交不親和性研究進展[J]. 牛寧,徐繼忠,陳海江.  河北林果研究. 2006(02)



本文編號：3639842