目的:通過檢測復(fù)合雜合突變導(dǎo)致遺傳性凝血因子Ⅴ（FⅤ）缺陷家系的表型和基因突變分析,探討其分子發(fā)病機制。方法:檢測先證者及其家系成員（共3代10人）血漿凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、纖維蛋白原（FIB）、FⅤ促凝活性（FⅤ∶C）、FⅤ抗原（FⅤ∶Ag）及其他相關(guān)凝血指標以明確診斷。采用DNA直接測序分析F5基因的所有外顯子、側(cè)翼、5’和3’非翻譯區(qū)及家系成員相應(yīng)的突變位點區(qū)域,發(fā)現(xiàn)突變位點用反向測序證實。使用ClustalX-2.1-win軟件分析突變氨基酸的保守性,PROVEAN和MutationTaster在線生物信息學軟件預(yù)測突變對蛋白質(zhì)功能的影響,Swiss-PdbViewer軟件在突變位點上進行蛋白質(zhì)模型和氨基酸相互作用分析。結(jié)果:先證者PT和APTT較正常對照健康體檢者顯著延長,分別為34.2 vs 13.2 s和119.3 vs 36.0 s; FⅤ∶C和FⅤ∶Ag極度降低,分別為3%和6%。先證者的第二子、第三子、女兒和孫子的PT和APTT略有延長,FⅤ∶C和FⅤ∶Ag均有不同程度的降低,其他家庭成員的相關(guān)凝血參數(shù)均在正常范圍內(nèi)。先證者6號外顯... 

【文章來源】：中國實驗血液學雜志. 2020,28(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    患者及其家系資料
    引物
    血液標本采集和凝血指標檢測
    基因組DNA提取及PCR擴增
    DNA測序及分析
    氨基酸突變位點保守性和生物信息學分析
    蛋白質(zhì)局部空間構(gòu)型變化分析
結(jié)果
    表型分析
    基因分析
    保守性和生物信息學分析
    蛋白質(zhì)局部空間構(gòu)型變化分析
討論



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