桃褐腐病（peach brown rot）是桃生產(chǎn)上最重要的病害之一,能夠造成嚴(yán)重的產(chǎn)量損失。為明確我國(guó)不同桃產(chǎn)區(qū)褐腐病菌的種類及多樣性和主要致病因素,本研究對(duì)我國(guó)不同桃產(chǎn)區(qū)褐腐病菌進(jìn)行了鑒定和遺傳多樣性分析,并測(cè)定了不同產(chǎn)區(qū)來(lái)源分離株的致病性和胞壁降解酶活性,同時(shí)對(duì)主要致病因子多聚半乳糖醛酸酶基因PG1進(jìn)行了克隆和表達(dá)分析,以探明不同產(chǎn)區(qū)桃褐腐病菌致病機(jī)制和差異,為不同產(chǎn)區(qū)桃褐腐病的防控提供理論基礎(chǔ)。從我國(guó)12個(gè)�。ㄊ�、自治區(qū)）共14個(gè)不同產(chǎn)區(qū)的桃褐腐病病果上分離獲得23株桃褐腐病菌分離株。各分離株的PDA平板菌落形態(tài)略有差異,但來(lái)自云南的分離株hfyn與其他分離株明顯不同。根據(jù)rDNA-ITS序列將云南分離株hfyn鑒定為云南叢梗孢（Monilia yunnanensis）,而其余22株分離株均鑒定為果生從梗孢（M fucticola）。多對(duì)特異性引物PCR以及多重PCR擴(kuò)增分析也確證了上述鑒定結(jié)果。SNP單核苷酸多態(tài)性、RAPD和ISSR分子標(biāo)記的遺傳多樣性分析表明,除鑒定為云南叢梗孢（M yunnanensis）的分離株hfyn與其他分離株親緣關(guān)系最遠(yuǎn)以外,浙江麗水分離株hfz... 

【文章來(lái)源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
    1 桃褐腐病概述
        1.1 發(fā)生與危害
        1.2 病菌及分布
        1.3 發(fā)生規(guī)律
        1.4 致病因子
        1.5 防治方法
    2 真菌的鑒定方法
        2.1 形態(tài)學(xué)鑒定
        2.2 分子鑒定
    3 真菌遺傳多樣性分析方法
        3.1 RAPD
        3.2 SSR
        3.3 ISSR
        3.4 SNP
        3.5 其他分子技術(shù)
    4 真菌致病因子研究進(jìn)展
        4.1 酶
        4.2 毒素
        4.3 植物激素
        4.4 效應(yīng)蛋白
    5 本研究的目的與意義
材料與方法
    1 材料
        1.1 植物材料
        1.2 菌株和質(zhì)粒
        1.3 主要試劑與儀器
        1.4 主要培養(yǎng)基
        1.5 常用溶液和緩沖液
    2 病菌分離與純化
        2.1 菌株分離、純化
        2.2 菌株的保存
    3 病菌的鑒定
        3.1 生物學(xué)形態(tài)鑒定
        3.2 分子鑒定
    4 多樣性分析
        4.1 SNP分析
        4.2 RAPD分析
        4.3 ISSR分析
    5 致病性測(cè)定
        5.1 病菌的致病性
        5.2 酶活性測(cè)定
    6 PG基因克隆與分析
        6.1 gDNA的提取
        6.2 目的片段的擴(kuò)增與回收
        6.3 生物信息學(xué)分析
    7 PG基因的原核表達(dá)
        7.1 表達(dá)載體的構(gòu)建
        7.2 融合蛋白的表達(dá)
        7.3 原核表達(dá)蛋白產(chǎn)物活性測(cè)定
結(jié)果與分析
    1 菌株的收集
        1.1 病菌的分離與純化
    2 病菌的鑒定
        2.1 形態(tài)學(xué)特征
        2.2 分子鑒定
    3 菌株遺傳多樣性分析
        3.1 SNP分析
        3.2 RAPD分析
        3.3 ISSR引物分析
    4 致病性測(cè)定
        4.1 病菌在桃果實(shí)上的致病性比較
        4.2 病菌在寄主與非寄主果實(shí)上的致病性
    5 胞壁降解酶的活性分析
        5.1 酶活性的測(cè)定
        5.2 粗酶液的表型
    6 PG基因克隆和生物信息學(xué)分析
        6.1 PG基因的克隆
        6.2 PG基因的生物信息學(xué)
    7 PG基因原核表達(dá)
        7.1 載體構(gòu)建
        7.2 PG基因的表達(dá)
        7.3 重組菌表達(dá)產(chǎn)物活性分析
討論
    1 桃褐腐病菌種類和分布
    2 褐腐病菌的遺傳多樣性
    3 PG多樣性及在致病中的作用
全文小結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]東北地區(qū)茄子黃萎病菌致病力分化與ISSR遺傳變異分析[J]. 賁海燕,曲紅云,高葦,張軍民,張雪巖,李寶聚,柴阿麗.  園藝學(xué)報(bào). 2019(07)
[2]25個(gè)無(wú)花果品系間種質(zhì)資源的RAPD分析[J]. 陳桂平,魯雪林.  中藥材. 2019(02)
[3]四種藥劑對(duì)桃褐腐病的防治效果試驗(yàn)報(bào)告[J]. 李正.  上海農(nóng)業(yè)科技. 2019(01)
[4]單核苷酸多態(tài)性（SNP）分子標(biāo)記在小麥遺傳育種中的研究進(jìn)展[J]. 吳澎,劉娟,田紀(jì)春.  農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào). 2019(01)
[5]一株新型稻瘟霉素鏈霉菌JZB130180的鑒定及其對(duì)桃褐腐病的生防效果評(píng)價(jià)（英文）[J]. Mi NI,Qiong WU,Hong-li WANG,Wei-cheng LIU,Bin HU,Dian-peng ZHANG,Juan ZHAO,De-wen LIU,Cai-ge LU.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2019(01)
[6]肟菌·戊唑醇等殺菌劑對(duì)桃褐腐病的防治效果[J]. 周華光,許燎原,梁文勇,楊芳立,汪春濤.  浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(12)
[7]新疆棉花黃萎病的發(fā)生現(xiàn)狀及其病原菌的分子鑒定與ISSR分析[J]. 劉海洋,王琦,王偉,張仁福,姚舉.  植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2018(06)
[8]香蕉枯萎病菌致病力分化與ISSR遺傳多樣性分析[J]. 黃穗萍,郭堂勛,李其利,唐利華,莫賤友,李焜華,孫憲昀.  植物保護(hù). 2018(06)
[9]青花菜乙烯反應(yīng)傳感蛋白基因BoERS的克隆與表達(dá)分析[J]. 蔣明,張志仙,張慧娟,管銘,陳孝賞,尹龍飛,劉潔.  核農(nóng)學(xué)報(bào). 2019(01)
[10]基于SSR標(biāo)記的桃種質(zhì)資源遺傳多樣性研究[J]. 凌士鵬,孫萍,林賢銳,沈建生.  江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2018(11)

博士論文
[1]中國(guó)核果/仁果類果樹(shù)褐腐病菌種群結(jié)構(gòu)及Cyt b基因的遺傳進(jìn)化研究[D]. 尹良芬.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]中國(guó)桃褐腐病菌及其抗藥性相關(guān)研究[D]. 胡勐郡.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013

碩士論文
[1]玉米彎孢葉斑病菌PG基因家族鑒定及Clpg1在致病性中的作用[D]. 趙豐舟.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2016
[2]果樹(shù)褐腐病菌Monilia yunnanensis遺傳多樣性的RAPD分析[D]. 閆大琦.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]桃褐腐病菌Monilia mumecola對(duì)四種殺菌劑的敏感性測(cè)定及遺傳多樣性分析[D]. 都勝芳.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]桃褐腐病菌Monilinia fructicola中Mona元件的功能研究[D]. 袁楠楠.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[5]小麥條銹病新抗源L693抗性基因的EST分子標(biāo)記作圖與共線性片段分析[D]. 王苓.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[6]水稻紋枯病菌PG基因的克隆、表達(dá)及致病性分析[D]. 張家豪.揚(yáng)州大學(xué) 2015
[7]RGA、HCBT類抗病相關(guān)基因在小麥抗葉銹近等基因系中的檢測(cè)分析[D]. 郭楠.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[8]葡萄水楊酸和茉莉酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中4個(gè)重要基因的克隆及表達(dá)分析[D]. 王文艷.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[9]金銀花內(nèi)生真菌的分離鑒定和分子系統(tǒng)學(xué)研究[D]. 殷法杰.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2011
[10]龍眼擬莖點(diǎn)霉細(xì)胞壁降解酶及其致病機(jī)理的研究[D]. 張洪祥.福建農(nóng)林大學(xué) 2010



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