桃褐腐�。╬each brown rot）是桃生產上最重要的病害之一,能夠造成嚴重的產量損失。為明確我國不同桃產區(qū)褐腐病菌的種類及多樣性和主要致病因素,本研究對我國不同桃產區(qū)褐腐病菌進行了鑒定和遺傳多樣性分析,并測定了不同產區(qū)來源分離株的致病性和胞壁降解酶活性,同時對主要致病因子多聚半乳糖醛酸酶基因PG1進行了克隆和表達分析,以探明不同產區(qū)桃褐腐病菌致病機制和差異,為不同產區(qū)桃褐腐病的防控提供理論基礎。從我國12個�。ㄊ�、自治區(qū)）共14個不同產區(qū)的桃褐腐病病果上分離獲得23株桃褐腐病菌分離株。各分離株的PDA平板菌落形態(tài)略有差異,但來自云南的分離株hfyn與其他分離株明顯不同。根據rDNA-ITS序列將云南分離株hfyn鑒定為云南叢梗孢（Monilia yunnanensis）,而其余22株分離株均鑒定為果生從梗孢（M fucticola）。多對特異性引物PCR以及多重PCR擴增分析也確證了上述鑒定結果。SNP單核苷酸多態(tài)性、RAPD和ISSR分子標記的遺傳多樣性分析表明,除鑒定為云南叢梗孢（M yunnanensis）的分離株hfyn與其他分離株親緣關系最遠以外,浙江麗水分離株hfz... 

【文章來源】：揚州大學江蘇省

【文章頁數】：90 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
    1 桃褐腐病概述
        1.1 發(fā)生與危害
        1.2 病菌及分布
        1.3 發(fā)生規(guī)律
        1.4 致病因子
        1.5 防治方法
    2 真菌的鑒定方法
        2.1 形態(tài)學鑒定
        2.2 分子鑒定
    3 真菌遺傳多樣性分析方法
        3.1 RAPD
        3.2 SSR
        3.3 ISSR
        3.4 SNP
        3.5 其他分子技術
    4 真菌致病因子研究進展
        4.1 酶
        4.2 毒素
        4.3 植物激素
        4.4 效應蛋白
    5 本研究的目的與意義
材料與方法
    1 材料
        1.1 植物材料
        1.2 菌株和質粒
        1.3 主要試劑與儀器
        1.4 主要培養(yǎng)基
        1.5 常用溶液和緩沖液
    2 病菌分離與純化
        2.1 菌株分離、純化
        2.2 菌株的保存
    3 病菌的鑒定
        3.1 生物學形態(tài)鑒定
        3.2 分子鑒定
    4 多樣性分析
        4.1 SNP分析
        4.2 RAPD分析
        4.3 ISSR分析
    5 致病性測定
        5.1 病菌的致病性
        5.2 酶活性測定
    6 PG基因克隆與分析
        6.1 gDNA的提取
        6.2 目的片段的擴增與回收
        6.3 生物信息學分析
    7 PG基因的原核表達
        7.1 表達載體的構建
        7.2 融合蛋白的表達
        7.3 原核表達蛋白產物活性測定
結果與分析
    1 菌株的收集
        1.1 病菌的分離與純化
    2 病菌的鑒定
        2.1 形態(tài)學特征
        2.2 分子鑒定
    3 菌株遺傳多樣性分析
        3.1 SNP分析
        3.2 RAPD分析
        3.3 ISSR引物分析
    4 致病性測定
        4.1 病菌在桃果實上的致病性比較
        4.2 病菌在寄主與非寄主果實上的致病性
    5 胞壁降解酶的活性分析
        5.1 酶活性的測定
        5.2 粗酶液的表型
    6 PG基因克隆和生物信息學分析
        6.1 PG基因的克隆
        6.2 PG基因的生物信息學
    7 PG基因原核表達
        7.1 載體構建
        7.2 PG基因的表達
        7.3 重組菌表達產物活性分析
討論
    1 桃褐腐病菌種類和分布
    2 褐腐病菌的遺傳多樣性
    3 PG多樣性及在致病中的作用
全文小結
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文目錄


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]25個無花果品系間種質資源的RAPD分析[J]. 陳桂平,魯雪林.  中藥材. 2019(02)
[3]四種藥劑對桃褐腐病的防治效果試驗報告[J]. 李正.  上海農業(yè)科技. 2019(01)
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博士論文
[1]中國核果/仁果類果樹褐腐病菌種群結構及Cyt b基因的遺傳進化研究[D]. 尹良芬.華中農業(yè)大學 2015
[2]中國桃褐腐病菌及其抗藥性相關研究[D]. 胡勐郡.華中農業(yè)大學 2013

碩士論文
[1]玉米彎孢葉斑病菌PG基因家族鑒定及Clpg1在致病性中的作用[D]. 趙豐舟.黑龍江八一農墾大學 2016
[2]果樹褐腐病菌Monilia yunnanensis遺傳多樣性的RAPD分析[D]. 閆大琦.華中農業(yè)大學 2016
[3]桃褐腐病菌Monilia mumecola對四種殺菌劑的敏感性測定及遺傳多樣性分析[D]. 都勝芳.華中農業(yè)大學 2016
[4]桃褐腐病菌Monilinia fructicola中Mona元件的功能研究[D]. 袁楠楠.華中農業(yè)大學 2015
[5]小麥條銹病新抗源L693抗性基因的EST分子標記作圖與共線性片段分析[D]. 王苓.四川農業(yè)大學 2015
[6]水稻紋枯病菌PG基因的克隆、表達及致病性分析[D]. 張家豪.揚州大學 2015
[7]RGA、HCBT類抗病相關基因在小麥抗葉銹近等基因系中的檢測分析[D]. 郭楠.河北農業(yè)大學 2013
[8]葡萄水楊酸和茉莉酸信號轉導途徑中4個重要基因的克隆及表達分析[D]. 王文艷.南京農業(yè)大學 2011
[9]金銀花內生真菌的分離鑒定和分子系統(tǒng)學研究[D]. 殷法杰.山東中醫(yī)藥大學 2011
[10]龍眼擬莖點霉細胞壁降解酶及其致病機理的研究[D]. 張洪祥.福建農林大學 2010



本文編號：3636423