核盤菌（Sclerotinia sclerotiorum）是一種寄主范圍廣,危害嚴(yán)重的植物病原真菌,引致的菌核病對我國油料作物的生產(chǎn)造成了嚴(yán)重影響�？梢砸鸷吮P菌致病力衰退的病毒,是防治菌核病的重要生防資源。核盤菌低毒相關(guān)DNA病毒SsHADV-1（Sclerotinia sclerotiorum hypovirulence associated DNA virus 1）可以突破寄主營養(yǎng)體不親和性限制進(jìn)行水平傳播,具有體外傳播方式等特性,生防潛力相比于其他報道病毒優(yōu)勢明顯。本論文以核盤菌和SsHADV-1為互作系統(tǒng),探討了SsHADV-1的基因功能、病毒直接侵染菌絲機制及核盤菌抗病毒的機理。初步探討了病毒SsHADV-1的衣殼蛋白Cp和復(fù)制相關(guān)蛋白Rep在核盤菌中的生物學(xué)功能。利用真菌啟動子PtrpC或EF-1α,獲得了在核盤菌菌株Ep-1PNA367中超量表達(dá)Cp和Rep基因的轉(zhuǎn)化子。兩種類型的轉(zhuǎn)化子中病毒的Cp和Rep基因可以單獨或共同轉(zhuǎn)錄,但是均檢測不到病毒蛋白翻譯。陽性轉(zhuǎn)化子在菌絲尖端形態(tài)、菌落形態(tài)、及產(chǎn)酸能力和致病力上均與菌株Ep-1PNA367不存在顯著性差異。此外,SsH... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省211工程院校教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

核盤菌在油菜上的侵染循環(huán)圖(Wangetal2017b)

圖 2.1 病毒 SsHADV-1 的 Cp 和 Rep 基因超表達(dá)轉(zhuǎn)化載體示意圖re 2.1 The schematic diagram of overexpression vectors of two genes Cp and ReSsHADV-1有潮霉素(50 μg/mL)PDA 培養(yǎng)基作為篩選條件，共獲得了 34 個轉(zhuǎn)子，18 個轉(zhuǎn) Rep 基因的候選轉(zhuǎn)化子。通過潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因

Hyg-F/ Hyg-R（附錄 4）和病毒相關(guān)基因引物對部分轉(zhuǎn)化子進(jìn)行 PCR 驗證（圖 2.2）。選陽性轉(zhuǎn)化子 Cp-24，Cp-27，Rep-1 和 Rep-10 為代表菌株，進(jìn)行生物學(xué)特性測定，菌株 Ep-1PNA367 和菌株 A367-HADV 為對照。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1][D].



本文編號：3617381