干旱、高鹽脅迫是影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育的主要原因。在遭受非生物脅迫威脅時(shí),植物通過(guò)受體感知、轉(zhuǎn)導(dǎo)脅迫信號(hào),啟動(dòng)一系列抗逆相關(guān)基因的表達(dá),最終緩解或抵御非生物脅迫對(duì)植物造成的傷害。其中,蛋白激酶作為上游信號(hào)途徑的組分,往往如“開(kāi)關(guān)”一樣發(fā)揮著關(guān)鍵作用。通過(guò)感知外界環(huán)境脅迫信號(hào),之后激活胞內(nèi)不同的蛋白磷酸化途徑,進(jìn)而調(diào)控下游耐逆基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá),啟動(dòng)相應(yīng)的耐逆生理生化過(guò)程,使其成為參與植物耐逆響應(yīng)機(jī)制的重要組成部分。Genevestigator分析發(fā)現(xiàn)水稻LRR-RLK基因OsRK2受干旱和鹽脅迫誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá),這暗示著OsRK2基因可能參與水稻的非生物脅迫響應(yīng)過(guò)程。為了明確蛋白激酶基因OsRK2的生物學(xué)功能,開(kāi)展了本課題研究。我們用RT-PCR、qRT-PCR檢測(cè)了 OsRK2基因在逆境處理不同時(shí)間后的表達(dá)水平。結(jié)果顯示,OsRK2顯著受到鹽和干旱脅迫的誘導(dǎo)表達(dá)。另外,干旱處理后,OsRK2pro::GUS染色顯著加深。OsRK2的亞細(xì)胞定位分析表明其定位于細(xì)胞質(zhì)膜上。當(dāng)用鹽、干旱分別處理OsRK2的敲除株系和擬南芥過(guò)表達(dá)株系,發(fā)現(xiàn)rk2敲除系的萌發(fā)率、根長(zhǎng)、芽長(zhǎng)等生長(zhǎng)均受到抑制,其耐受性顯著低... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１植物中ＬＲＲ－ＲＬＫ的結(jié)構(gòu)特征??

山東大學(xué)碩士學(xué)位論文??三結(jié)果與分析??１?受非生物脅迫以及ＡＢＡ的誘導(dǎo)??１．１仇／＾２受干旱誘導(dǎo)??依據(jù)?Ｇｅｎｅｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ?芯片數(shù)據(jù)平臺(tái)（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ＿ｇｅｎｅｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ．ｃｏｍ）預(yù)測(cè)，??如（圖３�。保粒┧�，Ｏｓ／＾２基因在多種組織中、在不同的干旱處理?xiàng)l件下，??表達(dá)均受到顯著誘導(dǎo)。為了驗(yàn)證該結(jié)果，我們用２０％?ＰＥＧ８０００模擬干旱環(huán)境，??對(duì)兩周大的野生型水稻幼苗進(jìn)行處理，利用ｑＲＴ－ＰＣＲ?（圖３－１－１Ｂ）和ＲＴ－ＰＣＲ??檢測(cè)Ｏｓ７＾２?（圖３－１－１Ｃ）的表達(dá)。結(jié)果表明，Ｏｓ／＾２基因隨著ＰＥＧ處理時(shí)間??的增加，表達(dá)水平不斷上調(diào)，并且在２４?ｈ時(shí)表達(dá)量最高，達(dá)到處理前的１１??倍。這些數(shù)據(jù)說(shuō)明０ＳＷＫ２可能參與調(diào)控水稻對(duì)干旱脅迫的適應(yīng)性。??Ａ?ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ?ｓｔｕｄ）?３?（Ｏｈａｇａｄｄｅｓｈｉ．?３ｔｉ｝?／?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｌｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅ?＾?２！?３?ｋ?１１?ｍ?＜〇〇〇’??＾?ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｂｏｎ?ｓｔｕｄｙ?３?（Ｄｈａｇａｄｄｅｓｈｉ．?６ｈ）?／?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｌｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅ?１９?３．ｓｏ?１３?ｗ?＜〇〇〇＇??ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ?ｓｔｕｄｙ?３?（ＩＲ２０．３ｈ）?／?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅｓ?（ＩＲ２０）?ｔ?８１?＇?９ｉ?３?８Ｓ?？〇〇〇＇??ＯＳ－００２２５?ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ?ｓｈｕｔｙ?３?（ＩＲ２０．６ｈ）?＾ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｓｅｅｄｌｉｎｇ?ｓａｍｐｌｅｓ?（ＩＲ２０

山東大學(xué)碩士學(xué)位論文??達(dá)水平，結(jié)果如（圖３－１－２Ａ３）所示，Ｏｓ７＾２基因受到ＮａＣｌ的顯著誘導(dǎo)，在??２４?ｈ時(shí)達(dá)到了處理前的１３倍。同時(shí)ＲＴ－ＰＣＲ的結(jié)果也證明了?Ｏｓ兄Ｏ的誘導(dǎo)情??況（圖３－１－２Ｃ）。進(jìn)一步說(shuō)明０ｓ／？Ａ：２基因不僅可以對(duì)干旱脅迫做出響應(yīng)，也對(duì)??鹽響應(yīng)強(qiáng)烈，０ＳＡＫ２基因在水稻適應(yīng)非生物脅迫的過(guò)程中可能發(fā)揮作用。??Ａ?１５?Ｂ??￥?１４－?—??｜?１２＿?■?１５０ｍＭ?ＮａＣｌ??ｉｏ－?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ?６ｈ?１２ｈ?２４ｈ??丄■?謹(jǐn)２?—１１！??■?■?Ａｃｔｉｎ??Ｉ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?６ｈ?１２ｈ?２４ｈ??１５０ｍＭ?ＮａＣｌ??圖３－１－２?ａｗ？／ｉｒ２基因受鹽誘導(dǎo)表達(dá)??Ａ：?１５０?ｍＭ?ＮａＣｌ處理２周齡水稻后定量ＰＣＲ檢測(cè)ａｓ？沿：２的誘導(dǎo)表達(dá)水平??Ｂ：?１５０?ｍＭ?ＮａＣｌ處理后的半定量檢測(cè)結(jié)果??１Ｊ仏尺們基因受ＡＢＡ誘導(dǎo)??我們還用ＡＢＡ進(jìn)行了處理，利用半定量檢測(cè)Ｏｓ／＾２的表達(dá)水平。結(jié)果如??（圖３－１－３）所示，Ｏｓ／ＪＧ基因經(jīng)過(guò)ＡＢＡ處理之后，在６ｈ條帶亮度明顯增??強(qiáng)，這說(shuō)明基因?qū)Γ粒拢劣幸欢ǖ捻憫?yīng)。??Ａ巳Ａ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?３ｈ?６ｈ?１２ｈ??ＡＣＴＩＮ?■?ｆ??０ｓＲＫ２【１?１?｜??圖３－丨－３?ａ、７？０基因受ＡＢＡ誘導(dǎo)上調(diào)??注：ＡＢＡ處理２周齡水稻３?ｈ，?６ｈ，?１２?ｈ后，半定量檢測(cè)ＣＵ尤２的表達(dá)水平??２?轉(zhuǎn)基因植株的獲得??２．１水稻過(guò)表達(dá)植株的獲得??２．１．１仍／？反２基因的克隆和中間載體構(gòu)建??為進(jìn)一步探宄基因的生物學(xué)功能，我們通過(guò)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]茉莉酸甲酯（MeJA）對(duì)水稻幼苗的抗旱生理效應(yīng)[J]. 董桃杏,蔡昆爭(zhēng),張景欣,榮輝,謝國(guó)政,曾任森.  生態(tài)環(huán)境. 2007(04)



本文編號(hào)：3613183