親免蛋白（Immunophilins）是最初在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的免疫抑制藥物在細(xì)胞內(nèi)的受體,根據(jù)其結(jié)合的配體的不同主要分為CYPs（cyclophilins,CYPs）和FKBPs（FK-506 binding proteins,FKBPs）兩大家族。親免蛋白廣泛存在各個(gè)生物體中,包括細(xì)菌、真菌、動(dòng)物和植物。研究表明,親免蛋白在植物中的數(shù)量最多。擬南芥基因組總共編碼了52個(gè)親免蛋白,其中有17個(gè)定位于葉綠體中,這表明葉綠體是包含親免蛋白最多的細(xì)胞器。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,擬南芥葉綠體中的17個(gè)親免蛋白中只有一個(gè)存在于基質(zhì)中,其余的16個(gè)均定位于類(lèi)囊體腔中。類(lèi)囊體膜是綠色植物光合大分子組裝的場(chǎng)所,那么數(shù)量最多的親免蛋白是否也參與了光合大分子的形成呢。已有報(bào)道擬南芥類(lèi)囊體腔中的一個(gè)親免蛋白CYP38對(duì)PSII的正確組裝及穩(wěn)定性維持具有重要的作用,此項(xiàng)研究為親免蛋白參與光合作用供了依據(jù)。CYP26-2也是類(lèi)囊體腔中的親免蛋白之一,分子量大小為26KD,那么該蛋白是否也參與了光合作用的過(guò)程,目前對(duì)于這方面還沒(méi)有確切的研究。本文主要對(duì)CYP26-2是否參與了光合作用的基本過(guò)程這一核心問(wèn)題進(jìn)行初步的探究。首先使... 

【文章來(lái)源】：西北大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：100 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

活性膠分離CYP26-2-HA植株葉片的類(lèi)囊體膜

第二章 CYP26-2 功能的初探分析圖 2.2 的結(jié)果，1-18 號(hào)樣品中都可檢測(cè)到 CYP26-2 的信號(hào)，但是他們的信號(hào)強(qiáng)度是不同的。其中信號(hào)最強(qiáng)的是 3、4、5、6 四個(gè)樣品， 根據(jù)他們?cè)诨钚阅z中的對(duì)應(yīng)位置，將 3 和 4、5 和 6 混和成兩個(gè)新的樣品，分別標(biāo)記為 a 和 b。13、14、15 三個(gè)樣品的信號(hào)相對(duì)較強(qiáng)，這三個(gè)樣品對(duì)應(yīng)于活性膠上 PSⅡ的位置，所以將其混合標(biāo)記為樣品 c。對(duì)于其他的 1-18 之間的樣品中檢測(cè)到的較弱的CYP26-2 的信號(hào)，我們認(rèn)為有可能是取樣過(guò)程中造成的污染。這部分的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也能從一定程度反應(yīng)出 CYP26-2 有可能參與了光合作用的過(guò)程。

圖 2.3 三種混合樣品活性膠及 Western Blotting 分析。A.三種混合樣品活性膠分析 B.活性膠 CYP26-2 蛋白的 Western Blotting 分析。Fig. 2.3 The analysis of three mixture samples by Blue Native PAGE and Western Blotting.A. The analysis of three mixture samples by Blue Native PAGE. B. he analysis of CYP26-2protein in Blue Native gel by Western Blotting.2.4 小結(jié)本章中我們使用藍(lán)色活性膠技術(shù)及蔗糖密度梯度離心技術(shù)分離 CYP26-2-HA 過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株葉片的類(lèi)囊體，通過(guò) Western Blotting 檢測(cè) CYP26-2 在兩種方法分離結(jié)果中的對(duì)應(yīng)位置，以此來(lái)探究 CYP26-2 是否參與的光合大分子的組裝。藍(lán)色活性膠的 WesternBlotting 檢測(cè)的結(jié)果表明部分 CYP26-2 的信號(hào)存在A B

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Application of CRISPR/Cas9 in plant biology[J]. Xuan Liu,Surui Wu,Jiao Xu,Chun Sui,Jianhe Wei.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2017(03)



本文編號(hào)：3606694