發(fā)布時(shí)間：2022-01-24 04:39

　　為檢測食品中的植物轉(zhuǎn)基因成分,自主構(gòu)建ppCaMV35S、ptNOS和ptCaMV35S 3種陽性質(zhì)粒作為試驗(yàn)陽性對照,選用2種內(nèi)源基因（pUbi、pRice-actin）和3種調(diào)控基因（pCaMV35S、tNOS和tCaMV35S）,利用TaqMan實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)對4種轉(zhuǎn)基因作物（玉米、水稻、棉花、大豆）和2種非轉(zhuǎn)基因作物（玉米、小麥）進(jìn)行轉(zhuǎn)基因成分檢測。特異性檢測結(jié)果表明,構(gòu)建的陽性質(zhì)粒能夠滿足實(shí)際檢測需要,且內(nèi)源基因和其他調(diào)控基因均具有較好的特異性。在轉(zhuǎn)基因棉花試樣中分別對調(diào)控基因pCaMV35S和tNOS進(jìn)行檢出限試驗(yàn),檢測結(jié)果顯示,在轉(zhuǎn)基因棉花試樣中pCaMV35S和tNOS的檢測限度分別為1、10 ng,能夠?qū)ι虡I(yè)化或處于中間試驗(yàn)階段的轉(zhuǎn)基因作物及產(chǎn)品進(jìn)行有效篩查檢測。 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,49(11)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

陽性質(zhì)粒擴(kuò)增曲線

不同基因在不同樣品中的特異性擴(kuò)增曲線

表4 調(diào)控基因(pCaMV35S、tNOS)引物和探針的檢出限檢測結(jié)果Tab.4 Result of LOD test for regulatory gene (pCaMV35S, tNOS) primers and probes 基因組DNA/(ng/μL) Genomic DNA Ct值 Ct Value pCaMV35S tNOS 100 28.17±0.33 28.05±0.40 10 31.47±0.27 31.79±0.16 1 34.18±0.39 35.09±0.39 0.1 35.87±0.26 38.99±1.22 0.01 36.60±0.64 39.26±0.84 0.001 36.36±0.35 37.59±0.52 0.000 1 35.68±0.84 39.33±1.14 0.000 01 36.09±0.39 39.32±0.723 結(jié)論與討論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3605865