利用同源克隆技術(shù)從蒲公英中克隆到銅鋅超氧化物歧化酶基因（Cu/ZnSOD）、抗壞血酸過(guò)氧化物酶基因（APX）和過(guò)氧化氫酶基因（CAT）3個(gè)抗氧化酶基因,采用生物信息學(xué)方法分析基因編碼的氨基酸序列,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法對(duì)鹽脅迫下的基因表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),以了解鹽脅迫下抗氧化酶系統(tǒng)變化機(jī)理。結(jié)果顯示:蒲公英Cu/ZnSOD、APX和CAT的編碼區(qū)序列長(zhǎng)度分別為474、852和1 479 bp,分別編碼157、283和492個(gè)氨基酸殘基的抗氧化酶。多序列比對(duì)和物種進(jìn)化關(guān)系表明,蒲公英3個(gè)抗氧化酶基因與萵苣和向日葵中相關(guān)基因的氨基酸序列同源性最高;與0 h相比,鹽脅迫處理3 h和6 h時(shí),3個(gè)抗氧化酶基因的表達(dá)量迅速增加,12 h時(shí)又有所降低;海水復(fù)合鹽脅迫對(duì)Cu/ZnSOD的影響相較于NaCl單鹽脅迫有所提高。綜上所述,鹽脅迫快速誘導(dǎo)了蒲公英抗氧化酶基因的表達(dá),以抵抗逆境脅迫,但經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的高鹽脅迫后,過(guò)量的活性氧在植株內(nèi)大量積累,對(duì)其細(xì)胞造成嚴(yán)重的損害,酶活性降低,植株正常生長(zhǎng)受到抑制,細(xì)胞內(nèi)基因的表達(dá)亦受到影響。 

【文章來(lái)源】：西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2020,29(11)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【部分圖文】：

TmoCu/ZnSOD1、 TmoAPX1和 TmoCAT1基因擴(kuò)增產(chǎn)物

TmoCu/ZnSOD1與其他植物Cu/ZnSODs氨基酸序列的比對(duì)

圖2 TmoCu/ZnSOD1與其他植物Cu/ZnSODs氨基酸序列的比對(duì)將克隆得到的蒲公英3個(gè)抗氧化酶基因與其他11個(gè)物種的抗氧化酶基因的氨基酸序列進(jìn)行多序列比對(duì),序列同源性見(jiàn)表2,結(jié)果表明,TmoCu/ZnSOD1與萵苣中的Cu/ZnSOD氨基酸同源性最高(93.63%),其次為向日葵(84.71%),然后是番茄(84.08%)、棉花(81.17%),與其他物種氨基酸同源性小于80%。TmoAPX1與萵苣和向日葵APX氨基酸同源性均大于90%,與棉花、毛果楊、葡萄和番茄同源性均大于80%,與其他物種氨基酸同源性小于80%。TmoCAT1與其他11個(gè)物種的CAT氨基酸同源性均大于80%,與萵苣、向日葵和毛果楊同源性較高。

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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本文編號(hào)：3605304