煙草是茄科煙草屬植物,具有極高的藥用價值和經(jīng)濟價值,煙草產(chǎn)業(yè)也為我國財政收入做出了巨大貢獻。煙草的產(chǎn)量和品質直接影響了其價值。煙草生長至一定階段,就會由營養(yǎng)生長轉變?yōu)樯成L,此時煙草體內大部分的營養(yǎng)物質就會被運輸至頂端,葉片、莖、根系生長滯后,而煙草的主要利用價值在于葉片,為了使煙草在栽培中一直進行營養(yǎng)生長,多年來人們探索出來的最有效的也是運用最廣泛的方法是打頂,原理是在煙草長出花序后的一段時間內,人為將其摘除,去除頂端優(yōu)勢,這樣煙草就會不再進行生殖生長,從而使養(yǎng)分都分配到葉片之中,獲得品質更好的煙葉。煙株對打頂傷害會產(chǎn)生多種生理響應,如植物激素源改變、根系二次生長、煙堿含量增加等。煙草 bHLH（basic/helix-loop-helix,bHLH）轉錄因子 PRE1（paclobutrazol resistance1）在植物體內可以整合多種激素信號調控細胞的伸長。我們檢測到煙草打頂會促進PRE1的表達明顯升高,推測其與煙草打頂后葉子的生長和根系的伸長有關,為了探究其對煙草生長發(fā)育的作用,本課題從煙草栽培品種K326（Nicotiana tabacum L.cv K326）中克隆... 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學河南省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ｂＨＬＨ轉錄因子結構Ｍｌ??

的伸長［６７】。這三個蛋白最先被證明可以促進植物細胞伸長的是ＰＲＥ１，有研宄表明，ｂＨＬＨ轉錄??因子ＡＣＥｓ通過與靶基因啟動子區(qū)域相互作用直接激活細胞伸長的酶基因的表達，ＩＨＢ１通過與??ＡＣＥ相互作用干擾ＡＣＥｓ與靶基因結合從而負調控細胞伸長。ＰＲＥ］通過與ＡＣＥｓ競爭結合ＩＨＢ１??間接影響ＡＣＥ的活力，ＰＲＥ１通過恢復ＡＣＥ的轉錄活性，從而促進細胞伸長１？１（圖２）。ＰＲＥ３??和ＰＲＥ６可以和ＡＩＦｓ?（負調控植物器官伸長的ＡＴＢＳ１作用因子）和ＨＦＲ１?（ＦＡＲ－ＲＥＤ］，長紅細??胞聚集素）等ｂＨＬＨ蛋白相互作用從而正向調節(jié)器官伸長［６７］。??ＢＫ?ＧＡ??Ａ?１?＾?Ｒ?ＢＲ?Ｇ．Ａ?ａｕｘｉｎ??Ａｓｔａｊ；?ＢＺＲ１?ｉ?ｖｉｚ??ｉ?、備?ｆ??ＡＣＥｓ＾ｌＢ５?１＾１?ＰＲＥ１?ＰＲ￡１??／?＼?／?Ｉ??ＣＯ?ｕｇｈ，?－■：－??ｂＨＬＭ?ｄｒｎｗｔ?ｂＨＵＶＨＬＨ?ＨＬＨＭＬＨ?ｄｗＭｆ??（ＤＮＡＷｎｄｉｎｇ）?（ｎｏｎ－ＤＭＡ?ｂ＞ｎｄｔｎ〇）?（ｎｏｔｖ－ＯＭＡ?ｂｉｎｄｉｎｇｉ?ＰＡＲＩ??｜?Ｐｈｏｔｏｍｏｒｐｈｏｙｅｆｔｅｅｉｓ??｜?ｐＮ?ｐ｜Ｆ４???？?ｐ＾４〈?？?Ｈｉｇｈ?ｔ？ｍｐ＊ｎｒｔｕｎｉ?ｒｍｐｏｎ？？??Ｃ?ｂｒ??１?ＧＡｓ?Ａｕｘｍ??Ｂ２Ｒ１?／?／??ＯｓＢ２Ｒ１?／?／??７?＼?Ｗ??Ａｌ?ＩＢＨ１?，??ＰＲＥ１??Ｏｓ?ＩＢＨ１１?ＩＵ１??Ｖ?／??Ｏｉｌ?ｅｔｏｎｇａｌｉｏｎ??圖２?ＰＲＥｌ參與調控細胞生長的三種分子機制％】??Ｆｉｇ．２?Ｔｈｒｅｅ?ｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｍｅｃｈａ

?＿??（ｔｕｎ．?ａｍｏ??Ｉ”，．ｖ?＊？Ｉ??—??－／?…二？?＼??ｌｉ?ｕ?—??＿？？ｗ?ｆ?＜?丨丨??Ｉ?Ｉ?＾?Ｔ?｜??＼?＼?．ｊ??ｒｔａｔ＊）?？？？?＊?％?＼?Ｋ?／??Ｍ？ｎ?？—ｉｉ?＼?＂Ｖ?ｍ?／??，ｔｗ，＾?Ｖ?？??．ＭＶ?ＢｕｏＭＩ?＼?Ｍ??ａｍ：?ｂｗｏｉｍｉ?？｜ｗｍｉ??ｍ??＜ｗ－?ｍｍ??．、？？＊？？?？＾＾＊＊＇＊＊＊??＇＊？?—??Ｍｚｉｎ?ｍｉｗ；??圖３?ｐＣＡＭＢＩＡＩ３００質粒信息??Ｆｉｇ．?３?ｐＣＡＭＢＩＡＩ３００?ｐｌａｓｍｉｄ?ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ??４．６．２目的基因連接表達載體??（１）對經(jīng)過雙酶切后的溶液進行電泳檢測驗證，并割膠回收，連接表達載體，轉入大腸桿菌，??然后在超凈工作臺進行涂平板（ｋａｎａ板），挑取單克隆菌體進行菌液ＰＣＲ，擴大培養(yǎng)后，提質粒。??（２）連接表達載體??表９表達載體連接體系??Ｔａｂｌｅ?９?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｖｅｃｔｏｒ?ｃｏｎｎｅｃｔｉｏｎ?ｓｙｓｔｅｍ???＾?加樣體積（ｆｉＬ）???１０，Ｔ４?ＤＮＡ?Ｌｉｇａｓｅ?ｂｕｆｆｅｒ?２．５??ＤＮＡ?３．５??ＰＣＡＭＢ１Ａ１３００?質粒?３．５??Ｔ４?ＤＮＡ?Ｌｉｇａｓｅ?１??Ｈ２０?１４．５??Ｔｏｔａｌ?ｖｏｌｕｍｅ?２５??（３）菌液ＰＣＲ??１７??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3600124