發(fā)布時間：2022-01-21 10:50

　　煙草是茄科煙草屬植物,具有極高的藥用價值和經(jīng)濟(jì)價值,煙草產(chǎn)業(yè)也為我國財(cái)政收入做出了巨大貢獻(xiàn)。煙草的產(chǎn)量和品質(zhì)直接影響了其價值。煙草生長至一定階段,就會由營養(yǎng)生長轉(zhuǎn)變?yōu)樯成L,此時煙草體內(nèi)大部分的營養(yǎng)物質(zhì)就會被運(yùn)輸至頂端,葉片、莖、根系生長滯后,而煙草的主要利用價值在于葉片,為了使煙草在栽培中一直進(jìn)行營養(yǎng)生長,多年來人們探索出來的最有效的也是運(yùn)用最廣泛的方法是打頂,原理是在煙草長出花序后的一段時間內(nèi),人為將其摘除,去除頂端優(yōu)勢,這樣煙草就會不再進(jìn)行生殖生長,從而使養(yǎng)分都分配到葉片之中,獲得品質(zhì)更好的煙葉。煙株對打頂傷害會產(chǎn)生多種生理響應(yīng),如植物激素源改變、根系二次生長、煙堿含量增加等。煙草 bHLH（basic/helix-loop-helix,bHLH）轉(zhuǎn)錄因子 PRE1（paclobutrazol resistance1）在植物體內(nèi)可以整合多種激素信號調(diào)控細(xì)胞的伸長。我們檢測到煙草打頂會促進(jìn)PRE1的表達(dá)明顯升高,推測其與煙草打頂后葉子的生長和根系的伸長有關(guān),為了探究其對煙草生長發(fā)育的作用,本課題從煙草栽培品種K326（Nicotiana tabacum L.cv K326）中克隆... 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ｂＨＬＨ轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)Ｍｌ??

的伸長［６７】。這三個蛋白最先被證明可以促進(jìn)植物細(xì)胞伸長的是ＰＲＥ１，有研宄表明，ｂＨＬＨ轉(zhuǎn)錄??因子ＡＣＥｓ通過與靶基因啟動子區(qū)域相互作用直接激活細(xì)胞伸長的酶基因的表達(dá)，ＩＨＢ１通過與??ＡＣＥ相互作用干擾ＡＣＥｓ與靶基因結(jié)合從而負(fù)調(diào)控細(xì)胞伸長。ＰＲＥ］通過與ＡＣＥｓ競爭結(jié)合ＩＨＢ１??間接影響ＡＣＥ的活力，ＰＲＥ１通過恢復(fù)ＡＣＥ的轉(zhuǎn)錄活性，從而促進(jìn)細(xì)胞伸長１？１（圖２）。ＰＲＥ３??和ＰＲＥ６可以和ＡＩＦｓ?（負(fù)調(diào)控植物器官伸長的ＡＴＢＳ１作用因子）和ＨＦＲ１?（ＦＡＲ－ＲＥＤ］，長紅細(xì)??胞聚集素）等ｂＨＬＨ蛋白相互作用從而正向調(diào)節(jié)器官伸長［６７］。??ＢＫ?ＧＡ??Ａ?１?＾?Ｒ?ＢＲ?Ｇ．Ａ?ａｕｘｉｎ??Ａｓｔａｊ；?ＢＺＲ１?ｉ?ｖｉｚ??ｉ?、備?ｆ??ＡＣＥｓ＾ｌＢ５?１＾１?ＰＲＥ１?ＰＲ￡１??／?＼?／?Ｉ??ＣＯ?ｕｇｈ，?－■：－??ｂＨＬＭ?ｄｒｎｗｔ?ｂＨＵＶＨＬＨ?ＨＬＨＭＬＨ?ｄｗＭｆ??（ＤＮＡＷｎｄｉｎｇ）?（ｎｏｎ－ＤＭＡ?ｂ＞ｎｄｔｎ〇）?（ｎｏｔｖ－ＯＭＡ?ｂｉｎｄｉｎｇｉ?ＰＡＲＩ??｜?Ｐｈｏｔｏｍｏｒｐｈｏｙｅｆｔｅｅｉｓ??｜?ｐＮ?ｐ｜Ｆ４???？?ｐ＾４〈?？?Ｈｉｇｈ?ｔ？ｍｐ＊ｎｒｔｕｎｉ?ｒｍｐｏｎ？？??Ｃ?ｂｒ??１?ＧＡｓ?Ａｕｘｍ??Ｂ２Ｒ１?／?／??ＯｓＢ２Ｒ１?／?／??７?＼?Ｗ??Ａｌ?ＩＢＨ１?，??ＰＲＥ１??Ｏｓ?ＩＢＨ１１?ＩＵ１??Ｖ?／??Ｏｉｌ?ｅｔｏｎｇａｌｉｏｎ??圖２?ＰＲＥｌ參與調(diào)控細(xì)胞生長的三種分子機(jī)制％】??Ｆｉｇ．２?Ｔｈｒｅｅ?ｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｍｅｃｈａ

?＿??（ｔｕｎ．?ａｍｏ??Ｉ”，．ｖ?＊？Ｉ??—??－／?…二？?＼??ｌｉ?ｕ?—??＿？？ｗ?ｆ?＜?丨丨??Ｉ?Ｉ?＾?Ｔ?｜??＼?＼?．ｊ??ｒｔａｔ＊）?？？？?＊?％?＼?Ｋ?／??Ｍ？ｎ?？—ｉｉ?＼?＂Ｖ?ｍ?／??，ｔｗ，＾?Ｖ?？??．ＭＶ?ＢｕｏＭＩ?＼?Ｍ??ａｍ：?ｂｗｏｉｍｉ?？｜ｗｍｉ??ｍ??＜ｗ－?ｍｍ??．、？？＊？？?？＾＾＊＊＇＊＊＊??＇＊？?—??Ｍｚｉｎ?ｍｉｗ；??圖３?ｐＣＡＭＢＩＡＩ３００質(zhì)粒信息??Ｆｉｇ．?３?ｐＣＡＭＢＩＡＩ３００?ｐｌａｓｍｉｄ?ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ??４．６．２目的基因連接表達(dá)載體??（１）對經(jīng)過雙酶切后的溶液進(jìn)行電泳檢測驗(yàn)證，并割膠回收，連接表達(dá)載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌，??然后在超凈工作臺進(jìn)行涂平板（ｋａｎａ板），挑取單克隆菌體進(jìn)行菌液ＰＣＲ，擴(kuò)大培養(yǎng)后，提質(zhì)粒。??（２）連接表達(dá)載體??表９表達(dá)載體連接體系??Ｔａｂｌｅ?９?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｖｅｃｔｏｒ?ｃｏｎｎｅｃｔｉｏｎ?ｓｙｓｔｅｍ???＾?加樣體積（ｆｉＬ）???１０，Ｔ４?ＤＮＡ?Ｌｉｇａｓｅ?ｂｕｆｆｅｒ?２．５??ＤＮＡ?３．５??ＰＣＡＭＢ１Ａ１３００?質(zhì)粒?３．５??Ｔ４?ＤＮＡ?Ｌｉｇａｓｅ?１??Ｈ２０?１４．５??Ｔｏｔａｌ?ｖｏｌｕｍｅ?２５??（３）菌液ＰＣＲ??１７??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]煙草重要基因篇:10.煙草轉(zhuǎn)錄因子基因[J]. 閆寧,張洪博.  中國煙草科學(xué). 2015(04)
[2]煙草藥用研究概述[J]. 田友清,丁平,張?jiān)茟c.  中國藥業(yè). 2015(09)
[3]NAC轉(zhuǎn)錄因子在植物抗病和抗非生物脅迫反應(yīng)中的作用[J]. 孫利軍,李大勇,張慧娟,宋鳳鳴.  遺傳. 2012(08)
[4]植物bHLH轉(zhuǎn)錄因子家族的功能研究進(jìn)展[J]. 劉曉月,王文生,傅彬英.  生物技術(shù)進(jìn)展. 2011(06)
[5]煙草打頂研究進(jìn)展[J]. 林中麟,石健林,周益.  江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2009(06)
[6]打頂對煙株根系活力及內(nèi)源激素含量的影響[J]. 時向東,劉艷芳,文志強(qiáng),黃克久,程剛.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2008(02)
[7]不同打頂時期對上部煙葉物理性狀及化學(xué)成分的影響[J]. 張永安,周冀衡,黃義德,楊述元,王瑞強(qiáng).  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2006(21)
[8]打頂時間對烤煙根系形態(tài)及煙堿含量的影響[J]. 易建華,賈志紅,孫在軍.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2006(12)
[9]影響煙草中煙堿含量的因素及調(diào)控措施[J]. 薛劍波,符云鵬,尹永強(qiáng).  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2005(06)
[10]打頂技術(shù)對烤煙產(chǎn)質(zhì)量和生物堿組成的影響[J]. 林桂華,周冀衡,范啟福,楊虹琦,曹睿玄.  中國煙草科學(xué). 2002(04)

博士論文
[1]煙草花青素合成相關(guān)基因及轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆與功能驗(yàn)證研究[D]. 白延紅.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012

碩士論文
[1]煙草NtLTP4基因的克隆及功能分析[D]. 鄭新新.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]基于煙草根尖組織響應(yīng)打頂傷害的轉(zhuǎn)錄組分析根冠交流模式[D]. 宋丹丹.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]煙草打頂前后根尖組織差異蛋白質(zhì)組分析[D]. 王少鑫.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]打頂時期對烤煙新陳代謝及產(chǎn)質(zhì)量的影響[D]. 莫靜靜.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號：3600124