目的構(gòu)建及鑒定人肝細(xì)胞生長因子（hHGF）基因和增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（EGFP）基因融合慢病毒表達(dá)載體（pNL-EGFP/CMV-hHGF）。方法應(yīng)用DNA重組技術(shù),將hHGF基因克隆到帶有EGFP基因的pNL慢病毒表達(dá)載體上,篩選陽性克隆,經(jīng)限制性內(nèi)切酶酶切鑒定重組載體后,送基因公司測序。結(jié)果重組質(zhì)粒經(jīng)限制性內(nèi)切酶酶切分析證實hHGF基因片段插入到慢病毒載體中,測序結(jié)果正確。結(jié)論成功構(gòu)建了pNL-EGFP/CMV-hHGF慢病毒表達(dá)載體,為進(jìn)一步研究hHGF基因的功能奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來源】：慢性病學(xué)雜志. 2020,21(06)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

MfeⅠ酶切鑒定pNL-EGFP/CMV-hHGF

慢病毒表達(dá)載體pNL-EGFP由福建醫(yī)科大學(xué)章濤教授惠贈，pUC-SRα/HGF質(zhì)粒由福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院林群教授惠贈（質(zhì)粒圖譜見圖1），限制性內(nèi)切酶NheⅠ、NotⅠ、KpnⅠ、MfeⅠ、klenow酶（Thermo）和T4 DNA連接酶（TaKaRa），質(zhì)粒小量抽提試劑盒（Omega），核酸膠回收試劑盒（Axgen），測序由上海生物工程公司完成。1.2 pNL-EGFP/CMV-hHGF基因的慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建和鑒定

pUC-SRα/HGF酶切


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