乙型肝炎病毒感染（HBV）是全球范圍內(nèi)的主要公共健康問題之一,尤其是包括我國在內(nèi)的發(fā)展中國家。雖然目前針對HBV的抗病毒治療可以抑制HBV的復(fù)制,但仍不能徹底清除HBV。部分慢性乙型肝炎（CHB）患者發(fā)展成為進(jìn)行性肝纖維化,并逐步導(dǎo)致了肝硬化,甚至是原發(fā)性肝細(xì)胞癌（簡稱肝癌）的發(fā)生。在我國,由于HBV感染的廣泛性和抗病毒治療的不規(guī)范性使得肝硬化和肝癌的發(fā)生比例較高。慢性HBV感染所導(dǎo)致的肝硬化和肝癌嚴(yán)重威脅著我國人民的生命健康,是我國十三五規(guī)劃中需要著重解決的重大課題。HBV X基因（HBx）作為HBV四個開放閱讀框之一,可以編碼出分子量為17KD的HBx蛋白。大量的研究證實HBx蛋白在肝硬化和肝癌的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮了至關(guān)重要的作用,是尤為重要的病毒蛋白。由于HBV復(fù)制過程中不準(zhǔn)確的逆轉(zhuǎn)錄和缺乏校對能力,HBx DNA存在多種變異。在前期研究中,我們通過測序技術(shù)在大隊列的肝癌癌組織和癌旁組織中對HBx的基因型進(jìn)行了調(diào)查,發(fā)現(xiàn)了一型攜帶多個位點共同變異的基因型,即HBx-EHBH2（HBx-E2）。預(yù)后分析表明攜帶HBx-E2的患者預(yù)后較好。此外,我們還初步研究了HBx-E2在肝癌細(xì)胞... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

HBx-E2基因型所攜帶的基因組變異位點及氨基酸變異位點

軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文：（1）陽性對照 HBx-Positive（HBx-P），該基因型被報道可以促進(jìn)細(xì)胞的增殖[22）野生型序列 HBx-Wild type（HBx-WT），我們比較了在原始隊列中所獲的 H因型序列，對于每一個單個的核苷酸位點，選擇出現(xiàn)頻率最高的堿基，最后形成型序列；（3）HBx-E2 基因型，將 HBx-WT 中的相應(yīng)位點轉(zhuǎn)換成 HBx-E2 所攜帶異位點；（4）HBx-E2-nonsynonymous（HBx-E2-N）基因型，提取 HBx-E2 所攜異位點中非同義位點，將 HBx-WT 中的相應(yīng)位點進(jìn)行替換；（5）HBx-E2-synonymHBx-E2-S）基因型，提取 HBx-E2 所攜帶變異位點中的同義位點，將 HBx-WT相應(yīng)位點進(jìn)行替換。5 種基因型序列的差異見圖 2（與 HBx-WT 相比較）。

圖 3 組織隊列中 HBx-E2 與患者較好預(yù)后相關(guān)A-B 圖為癌組織中攜帶 HBx-E2 基因型的患者 RFS（p=0.010）和 OS（p=0.03于攜帶其他基因型的患者。C-D 圖為癌旁組織中攜帶 HBx-E2 基因型的患者 RF=0.003）和 OS（p=0.025）均長于攜帶其他基因型的患者。3、在血清隊列中，HBx-E2 基因型指示了肝癌患者較好的預(yù)后；在前期研究中[42]，我們證明了患者外周血中 HBx-E2 的存在情況與癌旁組織的并且同樣有指示預(yù)后的作用。因此，我們搜集了另一中心的血清隊列（上海東外科醫(yī)院）進(jìn)一步明確 HBx-E2 在血清樣本中與預(yù)后的關(guān)系。我們共搜集了 168 例 HBV 相關(guān)肝癌患者的血清樣本，通過基因組 DNA 的抽Bx 基因的測序，我們成功在 160 例患者中獲得了全長的 HBx 基因序列。序列明，HBx-E2 在該隊列中所占比例為 31.3%（50/160）。對 HBx-E2 進(jìn)行預(yù)后分析表明：相對于其他基因型，攜帶有 HBx-E2 基因型的患者具有較長的 RFS（p=0.0長的 OS（p=0.045），見圖 4A 和 4B。

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號：3579589