目的:前期研究結果表明,釘螺頭足部組織浸出液（protein extract from head-foot tissue of Oncomelanian hupensis,PhfO）具有促進共培養(yǎng)日本血吸蟲母胞蚴生長發(fā)育的功能,但其潛在的分子調(diào)控機制尚不明確。果糖二磷酸醛縮酶（Fructose-1,6-bisphosphate aldolase,ALD）是糖酵解過程中的重要裂解酶,參與日本血吸蟲的能量代謝,在PhfO共培養(yǎng)母胞蚴體內(nèi)呈差異性上調(diào)表達,可能是調(diào)控母胞蚴生長發(fā)育的關鍵基因。本課題在此基礎上,進一步研究PhfO調(diào)控蟲體ald基因促進共培養(yǎng)母胞蚴生長發(fā)育的作用機制。方法:利用體外建立的PhfO與日本血吸蟲母胞蚴共培養(yǎng)體系,定期觀察、記錄PhfO共培養(yǎng)組和對照組母胞蚴的生長發(fā)育情況,測量其體長、體寬,計算各組母胞蚴的體積和存活率,同時檢測各組母胞蚴ATP代謝水平的變化。采用分子克隆方法,構建PET28（a）-Sjald的重組表達質粒,原核表達ALD蛋白,蛋白純化后免疫家兔,獲得ALD免疫血清。免疫熒光組織化學染色檢測ALD蛋白在母胞蚴體內(nèi)的分布和表達。培養(yǎng)第3、4、5和8天,re... 

【文章來源】：武漢大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PhfO共培養(yǎng)第3天和8天的日本血吸蟲母胞蚴Figure1MothersporocystsofS.japonicumculturedwith1%PhfO(Coculture)onthe3rdand8thday

PET28a(+)-Sjald重組表達質粒陽性克隆的篩選M:DNAMarkerDL2000；1-10：陽性克隆片段

rSjALD兔免疫血清的多克隆抗體滴度檢測A-H：依次為1:200、1:400、1:800、1:1600、1:3200、1:6400、1:12800、1:25600

【參考文獻】：
期刊論文
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