褐黃血蜱Cystatin家族的基因克
發(fā)布時間：2022-01-06 16:44
Cystatin是一種能抑制木瓜蛋白酶樣半胱氨酸蛋白酶活性的半胱氨酸蛋白酶抑制劑,有4個亞家族,其中家族2具有抗原蟲、抑制細胞凋亡等功能。在蜱類的生長發(fā)育過程中,唾液腺、卵巢等器官可分泌數(shù)種家族2,參與蜱吸血、血餐消化、胚胎發(fā)育等生理過程。本研究詳細研究了褐黃血蜱Hfcyst-1、Hfcyst-2、Hfcyst-3和Hfcyst-4的基因、表達和功能。1.以RACE法擴增Contig3911、Contig8700、Contig7143、Contig8976的5’和3’端,得Hfcyst-1、Hfcyst-2、Hfcyst-3和Hfcyst-4的全長cDNA。Hfcyst-1全長738 bp,ORF大小429 bp,編碼蛋白142aa;Hfcyst-2全長715 bp,ORF大小426 bp,編碼蛋白141aa;Hfcyst-3全長722 bp,ORF大小426 bp,編碼蛋白141aa;Hfcyst-4全長776 bp,ORF大小426 bp,編碼蛋白141aa。結(jié)構(gòu)分析表明,它們均屬于Cystatin家族2。2.RT-PCR法測定Hfcyst-1、Hfcyst-2、Hfcyst-3和...
【文章來源】：湖南農(nóng)業(yè)大學湖南省
【文章頁數(shù)】：70 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
Cystatin對半胱氨酸蛋白酶抑制活性示意圖
13bp，3"端產(chǎn)物大小為220bp。圖2-1Contig3911的5"-RACE和3"-RACE擴增產(chǎn)物（M：DL2000Marker；1：5"-RACE擴增結(jié)果；2：3"-RACE擴增結(jié)果）Fig.2-1Amplificationproductsof5"-RACEand3"-RACEofContig3911（M:DL2000Marker;1:5"-RACEamplificationresults;2:3"-RACEamplificationresults）拼接獲得Contig3911所在cDNA全長（命名為Hfcyst-1，登錄號為MK949070），見圖2-2。由圖可知，Hfcyst-1全長738bp，5"-UTR（非編碼區(qū)）長149bp，3"-UTR長160bp，ORF大小429bp，3"末端具有AATAAA和PolyA。圖2-2Hfcyst-1cDNA全長序列（圖中加直線下劃線的是5"-RACEInner引物，加波浪線下劃線的是3"-RACEInner，陰影部分為5"和3"-末端序列）Fig.2-2Full-lengthsequenceofHfcyst-1cDNA（Thelineunderlinedwiththelineisthe5"-RACEInnerprimer,thewavylineunderlinedthe3"-RACEInner,andtheshadedpartisthe5"and3"-endsequences.）2.2.2.2Contig8700的5"-RACE和3"-RACE擴增RACE法擴增Contig8700的5"和3"端結(jié)果見圖2-2。如圖顯示，5"端產(chǎn)物大小為180bp，3"端產(chǎn)物大小為480bp。
13bp，3"端產(chǎn)物大小為220bp。圖2-1Contig3911的5"-RACE和3"-RACE擴增產(chǎn)物（M：DL2000Marker；1：5"-RACE擴增結(jié)果；2：3"-RACE擴增結(jié)果）Fig.2-1Amplificationproductsof5"-RACEand3"-RACEofContig3911（M:DL2000Marker;1:5"-RACEamplificationresults;2:3"-RACEamplificationresults）拼接獲得Contig3911所在cDNA全長（命名為Hfcyst-1，登錄號為MK949070），見圖2-2。由圖可知，Hfcyst-1全長738bp，5"-UTR（非編碼區(qū)）長149bp，3"-UTR長160bp，ORF大小429bp，3"末端具有AATAAA和PolyA。圖2-2Hfcyst-1cDNA全長序列（圖中加直線下劃線的是5"-RACEInner引物，加波浪線下劃線的是3"-RACEInner，陰影部分為5"和3"-末端序列）Fig.2-2Full-lengthsequenceofHfcyst-1cDNA（Thelineunderlinedwiththelineisthe5"-RACEInnerprimer,thewavylineunderlinedthe3"-RACEInner,andtheshadedpartisthe5"and3"-endsequences.）2.2.2.2Contig8700的5"-RACE和3"-RACE擴增RACE法擴增Contig8700的5"和3"端結(jié)果見圖2-2。如圖顯示，5"端產(chǎn)物大小為180bp，3"端產(chǎn)物大小為480bp。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]褐黃血蜱卵蛋白質(zhì)組分析[J]. 徐律,程天印. 畜牧獸醫(yī)學報. 2019(03)
[2]褐黃血蜱cystatin基因全長的克隆及原核表達研究[J]. 和小明,劉磊. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2018(23)
[3]褐黃血蜱唾液菌群結(jié)構(gòu)分析[J]. 和小明,唐歡,程天印. 中國預防獸醫(yī)學報. 2016(07)
[4]褐黃血蜱的形態(tài)學與分子生物學鑒定[J]. 嚴芬,程天印. 中國獸醫(yī)學報. 2015(06)
[5]褐黃血蜱中腸內(nèi)容物菌群結(jié)構(gòu)分析[J]. 楊亞,劉進輝,程天印. 中國預防獸醫(yī)學報. 2015(04)
[6]硬蜱常用分子分類技術(shù)研究進展[J]. 楊亞,劉進輝,伏健,嚴芬,程天印. 動物醫(yī)學進展. 2014(11)
[7]褐黃血蜱與鈴頭血蜱的分子生物學鑒定[J]. 高東亞,田俊華,覃新程,王劍波,康雁君,張景山,周敦金,張居農(nóng),張永振. 中國媒介生物學及控制雜志. 2012(04)
[8]家養(yǎng)動物體表蜱中發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒分離及鑒定[J]. 姜曉林,王顯軍,李建東,丁淑軍,張全福,曲靖,張碩,李川,蕪為,姜梅,梁米芳,畢振強,李德新. 病毒學報. 2012(03)
[9]半胱氨酸蛋白酶抑制劑與免疫調(diào)節(jié)[J]. 鄭海音. 國外醫(yī)學(免疫學分冊). 2005(03)
[10]寄生蟲半胱氨酸蛋白酶抑制劑的類型及生物學功能[J]. 張曉艷,林建銀. 國外醫(yī)學(寄生蟲病分冊). 2005(02)
本文編號：3572814
【文章來源】：湖南農(nóng)業(yè)大學湖南省
【文章頁數(shù)】：70 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
Cystatin對半胱氨酸蛋白酶抑制活性示意圖
13bp，3"端產(chǎn)物大小為220bp。圖2-1Contig3911的5"-RACE和3"-RACE擴增產(chǎn)物（M：DL2000Marker；1：5"-RACE擴增結(jié)果；2：3"-RACE擴增結(jié)果）Fig.2-1Amplificationproductsof5"-RACEand3"-RACEofContig3911（M:DL2000Marker;1:5"-RACEamplificationresults;2:3"-RACEamplificationresults）拼接獲得Contig3911所在cDNA全長（命名為Hfcyst-1，登錄號為MK949070），見圖2-2。由圖可知，Hfcyst-1全長738bp，5"-UTR（非編碼區(qū)）長149bp，3"-UTR長160bp，ORF大小429bp，3"末端具有AATAAA和PolyA。圖2-2Hfcyst-1cDNA全長序列（圖中加直線下劃線的是5"-RACEInner引物，加波浪線下劃線的是3"-RACEInner，陰影部分為5"和3"-末端序列）Fig.2-2Full-lengthsequenceofHfcyst-1cDNA（Thelineunderlinedwiththelineisthe5"-RACEInnerprimer,thewavylineunderlinedthe3"-RACEInner,andtheshadedpartisthe5"and3"-endsequences.）2.2.2.2Contig8700的5"-RACE和3"-RACE擴增RACE法擴增Contig8700的5"和3"端結(jié)果見圖2-2。如圖顯示，5"端產(chǎn)物大小為180bp，3"端產(chǎn)物大小為480bp。
13bp，3"端產(chǎn)物大小為220bp。圖2-1Contig3911的5"-RACE和3"-RACE擴增產(chǎn)物（M：DL2000Marker；1：5"-RACE擴增結(jié)果；2：3"-RACE擴增結(jié)果）Fig.2-1Amplificationproductsof5"-RACEand3"-RACEofContig3911（M:DL2000Marker;1:5"-RACEamplificationresults;2:3"-RACEamplificationresults）拼接獲得Contig3911所在cDNA全長（命名為Hfcyst-1，登錄號為MK949070），見圖2-2。由圖可知，Hfcyst-1全長738bp，5"-UTR（非編碼區(qū)）長149bp，3"-UTR長160bp，ORF大小429bp，3"末端具有AATAAA和PolyA。圖2-2Hfcyst-1cDNA全長序列（圖中加直線下劃線的是5"-RACEInner引物，加波浪線下劃線的是3"-RACEInner，陰影部分為5"和3"-末端序列）Fig.2-2Full-lengthsequenceofHfcyst-1cDNA（Thelineunderlinedwiththelineisthe5"-RACEInnerprimer,thewavylineunderlinedthe3"-RACEInner,andtheshadedpartisthe5"and3"-endsequences.）2.2.2.2Contig8700的5"-RACE和3"-RACE擴增RACE法擴增Contig8700的5"和3"端結(jié)果見圖2-2。如圖顯示，5"端產(chǎn)物大小為180bp，3"端產(chǎn)物大小為480bp。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]褐黃血蜱卵蛋白質(zhì)組分析[J]. 徐律,程天印. 畜牧獸醫(yī)學報. 2019(03)
[2]褐黃血蜱cystatin基因全長的克隆及原核表達研究[J]. 和小明,劉磊. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2018(23)
[3]褐黃血蜱唾液菌群結(jié)構(gòu)分析[J]. 和小明,唐歡,程天印. 中國預防獸醫(yī)學報. 2016(07)
[4]褐黃血蜱的形態(tài)學與分子生物學鑒定[J]. 嚴芬,程天印. 中國獸醫(yī)學報. 2015(06)
[5]褐黃血蜱中腸內(nèi)容物菌群結(jié)構(gòu)分析[J]. 楊亞,劉進輝,程天印. 中國預防獸醫(yī)學報. 2015(04)
[6]硬蜱常用分子分類技術(shù)研究進展[J]. 楊亞,劉進輝,伏健,嚴芬,程天印. 動物醫(yī)學進展. 2014(11)
[7]褐黃血蜱與鈴頭血蜱的分子生物學鑒定[J]. 高東亞,田俊華,覃新程,王劍波,康雁君,張景山,周敦金,張居農(nóng),張永振. 中國媒介生物學及控制雜志. 2012(04)
[8]家養(yǎng)動物體表蜱中發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒分離及鑒定[J]. 姜曉林,王顯軍,李建東,丁淑軍,張全福,曲靖,張碩,李川,蕪為,姜梅,梁米芳,畢振強,李德新. 病毒學報. 2012(03)
[9]半胱氨酸蛋白酶抑制劑與免疫調(diào)節(jié)[J]. 鄭海音. 國外醫(yī)學(免疫學分冊). 2005(03)
[10]寄生蟲半胱氨酸蛋白酶抑制劑的類型及生物學功能[J]. 張曉艷,林建銀. 國外醫(yī)學(寄生蟲病分冊). 2005(02)
本文編號：3572814
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