類似鈣調(diào)磷酸酶B亞基蛋白（Calcineurin B-like proteins,CBLs）是高等植物體內(nèi)主要存在的一類鈣結(jié)合蛋白,它能與絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（CBL-interacting protein kinase,CIPK）互作從而參與到植物的逆境響應(yīng)和生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中。木薯是一種耐受非生物脅迫很好的一種材料。目前,人們對(duì)擬南芥的CBL基因及CBL-CIPK通路研究甚多,但對(duì)木薯CBL基因及其CBL-CIPK通路方面研究知之甚少。本研究從木薯中克隆CBL家族基因,利用生物信息學(xué)分析CBL蛋白的特征,利用熒光定量PCR技術(shù)研究不同脅迫下CBL基因的表達(dá)模式,并對(duì)CBL蛋白的功能進(jìn)行初步研究,主要研究結(jié)果如下:1.以擬南芥的CBL蛋白序列作為query序列,從木薯基因組DNA數(shù)據(jù)庫(kù)查找到序列,克隆得到木薯8個(gè)CBL基因,根據(jù)其與AtCBLs同源相似性最終分別命名為 MeCBL1、MeCBL2、MeCBL4、MeCBL5、MeCBL6、MeCBL8、MeCBL9、MeCBL10。2.利用ExPASY、CSS-Palm3.0等在線工具,發(fā)現(xiàn)MeCBLs蛋白分子量在24.50～28.74... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＣＢＬ蛋白結(jié)構(gòu)示意圖（Ｂａｔｉｓｔｉｃ?ｅｔ?ａｌ．，２００８）??Ｆｉｇ．?Ｉ?Ｇｅｎｅｒａｌ?ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ?ｏｆ?ＣＢＬ?ｐｒｏｔｅｉｎ（Ｂａｔｉｓｔｉｃ?ｅｔ?ａｌ．，２００８）??

圖２擬南芥ＣＢＬ家族各成員亞細(xì)胞定位模式圖（董連紅等，２０１５）??Ｆｉｇ．２?Ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ?ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ?ｐａｔｔｅｒｎ?ｏｆ?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ?ＣＢＬｓ??目前，擬南芥ＣＢＬ家族各成員亞細(xì)胞定位研宄的比較多（圖２）。運(yùn)用綠色熒光??蛋白（ＧＦＰ）融合蛋白己經(jīng)發(fā)現(xiàn)具有短的Ｎ－末端結(jié)構(gòu)域的ＣＢＬ蛋白（ＣＢＬ１、４、５和９）??２??

Ｆｉｇ．３?ＣＩＰＫｓ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｇｅｎｅｒａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?（Ｓｔｅｆａｎ?Ｗｅｉｎｌ?ｅｔ?ａｌ．，２００９）??ＣＩＰＫ在其激酶結(jié)構(gòu)域之后具有自抑制結(jié)構(gòu)域（ＮＡＦ／ＦＩＳＬ）?（Ｈｒａｂａｋｅｔａｌ．２００３）。??如圖３所示，ＣＩＰＫｓ也與其他激酶一樣，在活化環(huán)內(nèi)有催化結(jié)構(gòu)域，而它的調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)??域被分成ＮＡＦ／ＦＩＳＬ區(qū)域和蛋白隣酸酶互作區(qū)域（Ｐｒｏｔｅｉｎ－Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ?ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ，ＰＰＩ）??（Ｂａｔｉｓｔｉｃｅｔａｌ．，２００９）。ＰＰＩ主要負(fù)責(zé)ＣＩＰＫｓ與２Ｃ型蛋白磷酸酶之間的相互作用。ＣＩＰＫｓ??蛋白的自抑制區(qū)域（ＮＡＦ／ＦＩＳＬ），該區(qū)域由２４個(gè)氨基酸組成，主要結(jié)合ＣＢＬｓ，消除自??身的抑制作用，促使ＣＩＰＫｓ與ＣＢＬｓ相互作用（Ｈｒａｂａｋｅｔａｌ．，２００３），但其序列的可變性??較大，因此也決定了二者之間的特異性互作。ＮＡＦ具有疏水性，表明ＣＢＬ蛋白與ＣＩＰＫ??蛋白的互作是靠疏水性作用力實(shí)現(xiàn)的（Ｋｉｍ?ｅｔａｌ．，２０００；?Ａｌｂｒｅｃｈｔ?ｅｔａｌ．，?２００１）。ＮＡＦ??結(jié)構(gòu)域?qū)Γ茫桑校说鞍椎募っ富钚赃�具有抑制作用（Ｂａｔｉｓｔｉｃｅｔａｌ．，２００４），當(dāng)ＮＡＦ調(diào)節(jié)??域缺失時(shí)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]植物CBL基因家族的研究進(jìn)展[J]. 董連紅,史素娟,S M Nuruzzaman Manik,蘇玉龍,劉朝科,馮祥國(guó),胡曉明,王倩,劉好寶.  核農(nóng)學(xué)報(bào). 2015(05)
[2]植物體內(nèi)鈣信號(hào)及其在調(diào)節(jié)干旱脅迫中的作用[J]. 劉小龍,李霞,錢寶云,唐玉婷.  西北植物學(xué)報(bào). 2014(09)
[3]ABA與植物脅迫抗性[J]. 吳耀榮,謝旗.  植物學(xué)通報(bào). 2006(05)



本文編號(hào)：3561989