Brachyury對調(diào)控小鼠胚胎發(fā)育,尤其是中胚層的構(gòu)建發(fā)揮著關(guān)鍵作用,缺乏Brachyury蛋白的小鼠胚胎不能正常發(fā)育,Brachyury突變小鼠表現(xiàn)出短尾表型。Wnt和FGF信號通路在小鼠胚胎發(fā)育中可控制胚胎的軸向發(fā)育、EMT等重要的生理過程,Brachyury可能通過與上述兩種信號通路的相互作用而導(dǎo)致小鼠短尾表型的產(chǎn)生。為了揭示Brachyury與Wnt及FGF信號通路潛在的相互作用關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)首先使用一種便捷地合成RNA原位雜交探針的方法,對不同發(fā)育階段野生型整體小鼠胚胎進(jìn)行原位雜交,觀察了Brachyury在小鼠胚胎各個(gè)發(fā)育階段的位置表達(dá)情況。通過提取不同發(fā)育時(shí)期的Brachyury基因突變模型小鼠胚胎的總RNA,運(yùn)用熒光定量PCR技術(shù),檢測Brachyury基因、Wnt和FGF兩種信號通路相關(guān)基因的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:（1）Brachyury的表達(dá)在正常小鼠胚胎7.5dpc開始逐漸上調(diào),并在9.5dpc達(dá)到峰值,隨后表達(dá)量逐漸降低,而Brachyury突變小鼠胚胎的Brachyury表達(dá)趨勢與野生小鼠胚胎的表達(dá)情況一致,但表達(dá)量明顯低于同期野生型胚胎;（2）Ainx2在... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

經(jīng)典Wnt信號通路Fig.1CanonicalWntSignaling

而 FGF4 只出現(xiàn)在特定發(fā)育階段的特定細(xì)胞亞群當(dāng)中。一系列的，F(xiàn)GF 信號通路參與調(diào)控有絲分裂、成骨細(xì)胞分化、細(xì)胞遷移等重要生理過該家族與腫瘤的發(fā)生息息相關(guān)[56,57]。FGFR 是具有酪氨酸激酶活性的單程跨膜蛋白，與受體細(xì)胞外配體的結(jié)合啟導(dǎo)級聯(lián)反應(yīng)，最終導(dǎo)致目標(biāo)基因表達(dá)的改變。該信號通路級聯(lián)反應(yīng)大致為或硫酸肝素蛋白聚糖（HSPG）的干預(yù)下，F(xiàn)GF 配體和受體結(jié)合形成二聚體上的酪氨酸激酶磷酸化；磷酸化的酪氨酸被含有 SH2 結(jié)構(gòu)域的信號傳導(dǎo)介胞質(zhì)內(nèi)的信號級聯(lián)中，酪氨酸磷酸化位點(diǎn)可以與 Src、PLCγ等目標(biāo)酶結(jié)磷酸化，也可作為 Grb2 等銜接蛋白的結(jié)合位點(diǎn)。Grb2 通過 SH3 結(jié)構(gòu)域呤核苷酸釋放因子 Sos 結(jié)合，形成 Grb2-Sos 復(fù)合物，該復(fù)合物的形成導(dǎo)致 Ras 基因的募集，并進(jìn)一步激活了 GDP 和 GTP 之間的轉(zhuǎn)化[58,59]（圖 2）。

結(jié)果與分析.1 獲得短尾表型突變小鼠成功繁育獲得具有中、短尾表型的子代小鼠。短尾突變小鼠典型的表型特征部結(jié)構(gòu)只有約 0.5-1.5 cm 的尾芽, 因此稱之為“短尾（short tail）”，且大部分短鼠尾芽呈輕微卷曲狀。與此同時(shí)，部分突變小鼠還存在“中尾（middletail）”的表型特征，其尾巴的長度介于短尾與正常尾之間，而且“中尾”表型小鼠的尾梢如同刀切愈合后的“圓頭”狀，區(qū)別于野生型小鼠鼠尾錐尖形的表征 (圖 3、圖 4)對突變小鼠后代尾長的觀察中，我們發(fā)現(xiàn)突變小鼠尾長存在一定的差異，即短鼠的尾長普遍在 0.5-1.5 cm 范圍之內(nèi)，但也有個(gè)別更短或稍長的個(gè)體存在，而表型的小鼠尾長則有更復(fù)雜的情況，它們的尾長之差甚至可能達(dá)到 2 cm 以上。的結(jié)果似乎驗(yàn)證了有關(guān)報(bào)道提出的短尾表型嚴(yán)重程度與 Brachyury 基因劑量相的結(jié)論[2,7]。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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