紫蘇是一種食藥同源的油料作物。紫蘇種子含油量高達45-55%,其中α-亞麻酸(ALA,18:3Δ^9,12,13)含量約55%-65%。ALA是一種健康有益型脂肪酸,在促進人體大腦發(fā)育和保護心血管系統(tǒng)等方面具有非常重要的作用。本研究采用分子克隆技術從紫蘇發(fā)育種子分離三酰甘油（triacylglycerol,TAG）合成關鍵酶基因PfDGAT1（diacylglycerol acyltransferase 1）和PfDGAT2（diacylglycerol acyltransferase 2）,并分析這兩個基因在紫蘇不同組織器官和種子發(fā)育不同時期的表達譜。構建這兩個基因的表達載體,并分別轉化釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）和普通煙草（Nicotiana tobaccum,Sumsun NN（SNN））,以鑒定這兩個基因的生物學功能。本研究將為深入解析紫蘇油脂合成調控機制和油脂品質遺傳改良提供科學基礎。主要研究結果如下:1.基于紫蘇轉錄組數(shù)據(jù),鑒定獲得PfDGAT1和PfDGAT2基因轉錄本。定量PCR分析顯示,PfDGAT1和PfDGAT2... 

【文章來源】：山西農(nóng)業(yè)大學山西省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

紫蘇植株形態(tài)

11紫蘇不同組織器官的取材方法如下：根：根系樣品取于水培苗。挑選籽粒飽滿的‘晉紫蘇1號’和‘并紫蘇1號’種子，蒸餾水沖洗干凈后用0.01%的升汞溶液浸泡8-10min，無菌水沖洗3-4次，將種子放于鋪有滅菌濾紙的培養(yǎng)皿中，加入適量蒸餾水使濾紙保持濕潤，置于光照培養(yǎng)箱暗培養(yǎng)使紫蘇種子萌發(fā)。側根長出后將幼苗移至1/2MS培養(yǎng)液中，用泡沫板固定后繼續(xù)培養(yǎng)，待幼苗的根長到6-10cm左右時進行取材，放入無RNA酶的EP管中，液氮速凍5min后保存于﹣80℃超低溫冰箱備用。莖、葉、花和種子均取自種植于山西農(nóng)業(yè)大學試驗站的紫蘇植株。待紫蘇生長旺盛時，取植株頂端幼嫩的莖、葉，液氮速凍后存于﹣80℃冰箱。盛花期開始掛牌標記花朵，分別取花和不同發(fā)育時期（開花后10、20、30、40d）的種子，放入無RNA酶的EP管中，液氮速凍后存于﹣80℃冰箱。圖2-2a‘晉紫蘇1號’不同組織Fig.2-2aDifferenttissuesof‘Jinzisu1’

12圖2-2b‘并紫蘇1號’不同組織Fig.2-2bDifferenttissuesof‘Bingzisu1’2.1.2主要試劑EASYspin植物RNA快速提取試劑盒（RN09，購于艾德萊生物公司），5XAll-In-OneMasterMix(withAccuRTGenomicDNARemovalKit)反轉錄試劑盒（購于ABM公司），EvaGren2XqPCRMasterMix熒光定量PCR試劑盒（購于ABM公司），SanTaqPCRMix（購于生工生物科技股份有限公司），DEPC（購于Biotopped公司），Nuclease-freeH2O、ddH2O等。2.1.3主要儀器高壓蒸汽滅菌鍋（AutoclaveGI80TW）；普通PCR擴增儀（BIOER）；實時熒光定量PCR儀（Bio-RAD）；各種劑量的移液槍（Eppendrof）；小型離心機（eppendorf、Centrifuge5424R）；漩渦振蕩儀；金屬��；瓊脂糖凝膠電泳儀（DYY-7C/8C型）；BioDrop蛋白核酸分析儀；紫外凝膠成像系統(tǒng)（Bio-rad）等。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3560079