甘藍(lán)型油菜BnaWRKY30-like基因cDNA序列克隆及生物信息學(xué)分析
發(fā)布時(shí)間:2021-12-29 22:37
WRKY轉(zhuǎn)錄因子是植物所特有的一個(gè)超級(jí)基因家族,能調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程及逆境反應(yīng)。根據(jù)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序獲得的EST序列設(shè)計(jì)引物,利用RT-PCR及RACE技術(shù)克隆了甘藍(lán)型油菜WRKY30基因cDNA全長(zhǎng)序列,并運(yùn)用生物信息學(xué)手段對(duì)序列進(jìn)行了分析及預(yù)測(cè)。結(jié)果表明:BnaWRKY30-like基因全長(zhǎng)cDNA序列中包含102 bp的5′-UTR序列,188 bp的3′-UTR序列以及942 bp的完整ORF,編碼313個(gè)氨基酸。該轉(zhuǎn)錄因子蛋白相對(duì)分子量為35 319.85D,等電點(diǎn)為6.22,基本氨基酸中含量最高的絲氨酸(Ser),313個(gè)氨基酸中含有41個(gè)酸性氨基酸,34個(gè)堿性氨基酸,在121~182區(qū)域含有一個(gè)典型的WRKY結(jié)構(gòu)域。亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)該轉(zhuǎn)錄因子定位于細(xì)胞核的可能性最高。蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)表明共有α-螺旋占26.20%,延伸鏈占10.54%,β-轉(zhuǎn)角占4.47%,無(wú)規(guī)則卷曲占58.79%。BnaWRKY30-like基因編碼的蛋白具有典型的WRKY轉(zhuǎn)錄因子特征,與擬南芥WRKY30基因親緣關(guān)系近,可能在油菜早期生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程及鹽脅迫中的發(fā)揮調(diào)控作用。
【文章來(lái)源】:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,47(05)CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)
【部分圖文】:
油菜BnaWRKY30-like基因的RACE擴(kuò)增結(jié)果
利用NCBI blast程序比對(duì)分析發(fā)現(xiàn)其與Brassica napus WRKY30(Accession:XP_013643451.1)、Brassica oleracea WRKY30(Accession:XP_013596670.1)和Brassica rapa WRKY30(Accession:NP_001288989.1)轉(zhuǎn)錄因子的氨基酸序列相似性最高,即命名為BnaWRKY30-like。利用DNAMAN8.0軟件將BnaWRKY30-like與Brassica napus WRKY30、Brassica oleraceaWRKY30、Brassica rapaWRKY30進(jìn)行多序列比對(duì)結(jié)果如圖2所示。這4個(gè)轉(zhuǎn)錄因子氨基酸序列高度相似,但均在不同的位置存在少數(shù)氨基酸差異。圖3 BnaWRKY30-like蛋白氨基酸序列保守結(jié)構(gòu)域檢索
BnaWRKY30-like蛋白氨基酸序列保守結(jié)構(gòu)域檢索
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]植物WRKY轉(zhuǎn)錄因子家族研究進(jìn)展[J]. 黃幸,丁峰,彭宏祥,潘介春,何新華,徐炯志,李琳. 生物技術(shù)通報(bào). 2019(12)
[2]柱花草WRKY轉(zhuǎn)錄因子在低磷脅迫下的克隆與分析[J]. 文亦芾,單貴蓮,姜飛,白喻,劉金鳳,韓博. 西北植物學(xué)報(bào). 2019(02)
[3]辣椒CaWRKY8基因克隆及脅迫下的表達(dá)分析[J]. 刁玄章,王述彬,刁衛(wèi)平,潘寶貴,戈偉,高青海. 西北植物學(xué)報(bào). 2019(02)
[4]擬南芥中WRKY31轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄活性與互作蛋白分析[J]. 王藝橋,趙新杰,牛芳芳,郭小華,楊博,江元清. 生物技術(shù)通報(bào). 2018(05)
[5]WRKY轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展[J]. 張凡,尹俊龍,郭瑛琪,岳艷玲. 生物技術(shù)通報(bào). 2018(01)
[6]煙草NtWRKY40在植物應(yīng)答病毒侵染過(guò)程中的作用[J]. 劉晶晶,程春玲,席玉珍,魏書(shū). 生物技術(shù)通報(bào). 2016(10)
[7]水稻-病原互作中的重要角色:WRKY類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子[J]. 成洪濤,王石平. 中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2014(08)
[8]WRKY轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)及其在植物抗逆境脅迫中的功能[J]. 伍林濤,杜才富,張敏琴,周凌,韓宏仕. 分子植物育種. 2013(04)
[9]TcLr35小麥β(1,3;1,4)葡聚糖苷酶基因cDNA全長(zhǎng)的克隆及分析[J]. 王海燕,劉大群,楊文香,李在峰,張立榮,李星. 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2010(04)
碩士論文
[1]油菜轉(zhuǎn)錄因子BnWRKY75基因的遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)化子的抗病性鑒定[D]. 王亞婷.浙江大學(xué) 2013
[2]擬南芥microRNA啟動(dòng)子甲基化的分析以及AtWRKY30轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能研究[D]. 段麗君.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號(hào):3556973
【文章來(lái)源】:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,47(05)CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)
【部分圖文】:
油菜BnaWRKY30-like基因的RACE擴(kuò)增結(jié)果
利用NCBI blast程序比對(duì)分析發(fā)現(xiàn)其與Brassica napus WRKY30(Accession:XP_013643451.1)、Brassica oleracea WRKY30(Accession:XP_013596670.1)和Brassica rapa WRKY30(Accession:NP_001288989.1)轉(zhuǎn)錄因子的氨基酸序列相似性最高,即命名為BnaWRKY30-like。利用DNAMAN8.0軟件將BnaWRKY30-like與Brassica napus WRKY30、Brassica oleraceaWRKY30、Brassica rapaWRKY30進(jìn)行多序列比對(duì)結(jié)果如圖2所示。這4個(gè)轉(zhuǎn)錄因子氨基酸序列高度相似,但均在不同的位置存在少數(shù)氨基酸差異。圖3 BnaWRKY30-like蛋白氨基酸序列保守結(jié)構(gòu)域檢索
BnaWRKY30-like蛋白氨基酸序列保守結(jié)構(gòu)域檢索
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]植物WRKY轉(zhuǎn)錄因子家族研究進(jìn)展[J]. 黃幸,丁峰,彭宏祥,潘介春,何新華,徐炯志,李琳. 生物技術(shù)通報(bào). 2019(12)
[2]柱花草WRKY轉(zhuǎn)錄因子在低磷脅迫下的克隆與分析[J]. 文亦芾,單貴蓮,姜飛,白喻,劉金鳳,韓博. 西北植物學(xué)報(bào). 2019(02)
[3]辣椒CaWRKY8基因克隆及脅迫下的表達(dá)分析[J]. 刁玄章,王述彬,刁衛(wèi)平,潘寶貴,戈偉,高青海. 西北植物學(xué)報(bào). 2019(02)
[4]擬南芥中WRKY31轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄活性與互作蛋白分析[J]. 王藝橋,趙新杰,牛芳芳,郭小華,楊博,江元清. 生物技術(shù)通報(bào). 2018(05)
[5]WRKY轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展[J]. 張凡,尹俊龍,郭瑛琪,岳艷玲. 生物技術(shù)通報(bào). 2018(01)
[6]煙草NtWRKY40在植物應(yīng)答病毒侵染過(guò)程中的作用[J]. 劉晶晶,程春玲,席玉珍,魏書(shū). 生物技術(shù)通報(bào). 2016(10)
[7]水稻-病原互作中的重要角色:WRKY類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子[J]. 成洪濤,王石平. 中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2014(08)
[8]WRKY轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)及其在植物抗逆境脅迫中的功能[J]. 伍林濤,杜才富,張敏琴,周凌,韓宏仕. 分子植物育種. 2013(04)
[9]TcLr35小麥β(1,3;1,4)葡聚糖苷酶基因cDNA全長(zhǎng)的克隆及分析[J]. 王海燕,劉大群,楊文香,李在峰,張立榮,李星. 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2010(04)
碩士論文
[1]油菜轉(zhuǎn)錄因子BnWRKY75基因的遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)化子的抗病性鑒定[D]. 王亞婷.浙江大學(xué) 2013
[2]擬南芥microRNA啟動(dòng)子甲基化的分析以及AtWRKY30轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能研究[D]. 段麗君.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號(hào):3556973
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