為了探究外源一氧化氮（nitric oxide,NO）熏蒸處理對(duì)伽師瓜（Cucumis melo L.）采后貯藏過程中AOX基因表達(dá)及抗氰呼吸途徑的影響,以伽師瓜為試材,采用外源60μL/L NO熏蒸3 h,以不充入NO氣體作為對(duì)照,在（5±0.5）℃條件下貯藏49 d。根據(jù)甜瓜基因組數(shù)據(jù)庫,通過EST設(shè)計(jì)引物,克隆獲得伽師瓜AOX基因全長(zhǎng)序列。得到的基因片段同其他物種的AOX基因具有高度的同源性,命名為Cm AOX。通過拼接獲得AOX基因的c DNA全長(zhǎng)序列,基因c DNA全長(zhǎng)為1300 bp,開放閱讀框架為1042 bp,擬編碼346個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)分子量為39606.6 Da,等電點(diǎn)為9.00。該基因已在Gene Bank登錄,登錄號(hào)為:KM273124。通過熒光定量分析及抗氰呼吸速率的測(cè)定表明,經(jīng)60μL/L NO處理果實(shí)的Cm AOX的表達(dá)量和抗氰呼吸速率明顯高于對(duì)照果實(shí)。說明NO處理對(duì)伽師瓜采后貯藏過程中抗氰呼吸途徑的影響可能與其調(diào)控AOX基因的表達(dá)密切相關(guān)。 

【文章來源】：食品工業(yè)科技. 2017,38(16)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 伽師瓜的處理方法
        1.2.2 伽師瓜果實(shí)總RNA的提取
        1.2.3 AOX基因片段的克隆
        1.2.4 伽師瓜果實(shí)AOX c DNA全長(zhǎng)序列的克隆與分析
        1.2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
        1.2.6 伽師瓜果實(shí)抗氰呼吸速率的測(cè)定
2 結(jié)果與分析
    2.1 伽師瓜總RNA電泳圖
    2.2 RT-PCR擴(kuò)增伽師瓜果實(shí)AOX基因片段
    2.3 伽師瓜果實(shí)AOX基因c DNA全長(zhǎng)擴(kuò)增
    2.4 序列分析
        2.4.1 Cm AOX基因的氨基酸序列比對(duì)分析
        2.4.2 伽師瓜交替氧化酶基因Cm AOX的進(jìn)化樹分析
        2.4.3 Cm AOX蛋白的三維結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)
    2.5 NO處理對(duì)伽師瓜果實(shí)AOX基因表達(dá)的影響
    2.6 NO處理對(duì)伽師瓜果實(shí)抗氰呼吸速率的影響
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]線粒體電子傳遞呼吸鏈及其生物學(xué)意義的研究進(jìn)展[J]. 徐婷,李華,魯姍姍,張紅旗,葛均波.  復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015(02)
[2]ZnCl2脅迫下抗氰呼吸對(duì)煙草細(xì)胞活力和過氧化氫水平的影響[J]. 馮漢青,王婉,王玉佩,王慶文,管冬冬,賈凌云.  陜西師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(01)
[3]光照下菜豆葉片抗氰呼吸與光合作用關(guān)系的分析[J]. 馮漢青,管東東,焦青松,賈凌云,孫坤.  植物生態(tài)學(xué)報(bào). 2015(01)
[4]一氧化氮對(duì)新疆伽師瓜果實(shí)采后貯藏品質(zhì)的影響[J]. 胡江偉,周江,朱璇,阿塔吾拉·鐵木爾,吳斌.  食品工業(yè)科技. 2015(13)
[5]交替氧化酶在果蔬抗氰呼吸途徑的調(diào)控機(jī)制[J]. 郭芹,李慶鵬,靳婧,李偉明,哈益明.  生物技術(shù)進(jìn)展. 2013(06)
[6]紅掌交替氧化酶基因克隆及其在低溫脅迫下的表達(dá)分析[J]. 劉慧春,田丹青,劉建新,馬廣瑩,鄒清成,朱祝軍.  核農(nóng)學(xué)報(bào). 2013(10)
[7]不同光強(qiáng)下交替氧化酶基因修飾的兩種擬南芥葉片葉綠素?zé)晒馓匦缘淖兓痆J]. 馮漢青,湯淑珍,李淮.  廣西植物. 2013(05)
[8]西瓜交替氧化酶AOX2基因的克隆與分析[J]. 李嚴(yán)曼,朱磊,楊景華,張明方.  果樹學(xué)報(bào). 2011(05)
[9]UV-B和NO對(duì)玉米幼苗根系呼吸作用的影響[J]. 湯紅官,張滿效,何元慶.  蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2010(02)

碩士論文
[1]心葉煙交替氧化酶基因（NgAOX1α）的分離及其表達(dá)特性分析[D]. 王健.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3548344