喹啉酸核糖基轉(zhuǎn)移酶（quinolinic acid phosphoribosyltransferase,QPT）是煙堿生物合成途徑中的關(guān)鍵限速酶,同時也在植物初生代謝中扮演了重要角色。本研究分別構(gòu)建了煙草QPT基因植物超量表達(dá)載體和干涉表達(dá)載體,并利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化煙草,研究NtQPT基因?qū)煵菪螒B(tài)和品質(zhì)的影響,取得以下主要結(jié)果:（1）采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將煙草QPT基因超量表達(dá)和干涉表達(dá)載體遺傳轉(zhuǎn)化煙草,依次經(jīng)GUS組織化學(xué)染色、PCR鑒定篩選獲得轉(zhuǎn)35S::QPT（超量表達(dá)）植株32株和轉(zhuǎn)35S::QPTi（干涉表達(dá)）植株31株。為了探明QPT在煙草生長和品質(zhì)形成中的作用提供了研究材料。（2）對不同生育期轉(zhuǎn)基因煙草形態(tài)特征觀察發(fā)現(xiàn),干涉NtQPT基因表達(dá)煙草植株的株高、莖圍等均顯著低于超量表達(dá)NtQPT基因和野生型煙草。旺長期的轉(zhuǎn)35S::QPTi干擾表達(dá)煙草植株株高和莖圍與野生型相比差異最為顯著（P<0.01）。分別比野生型低31.77%和27.51%,比超量表達(dá)植株低42.02%和36.78%。此外,干涉植株的開花推遲,花粉粒直徑也顯著小于野生型。（3）測定光合特性發(fā)現(xiàn),... 

【文章來源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

煙堿的生物合成途徑Figure2.1Nicotinebiosynthesispathway

質(zhì)環(huán)化酶間接影響 ABA 的合成(Barrero et al., 2離子通道的開關(guān)，進(jìn)而直接影響細(xì)胞內(nèi)鉀離子的滲透調(diào)劑物質(zhì)如脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋定性。因此，推測 QPT 的活性對于煙草 K+和總及意義種重要的經(jīng)濟(jì)作物，其產(chǎn)生的行業(yè)利稅是政府財中的核心化學(xué)成分，其合成與調(diào)控相關(guān)基因的研點(diǎn)。本研究以探索煙堿合成中的關(guān)鍵基因 QPT成過程的作用為內(nèi)容，擬通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得株系，研究其生長狀況，光合能力及品質(zhì)指標(biāo)，培育煙草新種質(zhì)提供參考。

貴州大學(xué)碩士畢業(yè)論文研究所用的超量表達(dá)喹啉酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(quinolinate phospltransferase , QPT) 基 因 的 pSH737-35S-QPT 載 體 及 其 原 始 載37(圖 2.1)，以及根癌農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens) LBA4404 和大腸cherichia coli)DH5α均由貴州大學(xué)山地植物資源保護(hù)與種質(zhì)創(chuàng)新省部共重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室保存并提供。


本文編號：3547872