目的:探討肝細胞表達CYP21A2對肝細胞線粒體氧化磷酸化的影響。方法:通過腺病毒轉(zhuǎn)染獲得穩(wěn)定傳代的CYP21A2HepG2細胞系,采用RNA干擾或外顯子啟動CYP21A2基因在HepG2細胞系中的表達,CYP21A2低表達HepG2組對照正常HepG2組、CYP21A2高表達HepG2組對照陰性HepG2組,提取RNA,進行全基因組轉(zhuǎn)錄表達譜芯片檢測并差異性表達分析,生物信息學分析篩選各組肝細胞線粒體呼吸鏈差異表達基因,實時熒光定量驗證。結(jié)果:CYP21A2基因沉默和過表達HepG2細胞線粒體呼吸鏈關(guān)鍵基因Ndufa2.Ndufa3均發(fā)生表達水平的顯著性改變,實時熒光定量驗證結(jié)果顯示:正常對照組CYP21A2的Ndufa2表達為1.008±0.141,高于CYP21A2沉默組0.678±0.211(t=2.900,p<0.05);空載對照CYP21A2的Ndufa2表達為1.023±0.238,高于CYP21A2過表達組0.645±0.133(t=3.095,p<0.05);正常對照組CYP21A2的Ndufa3表達為1.009±0.145,高于CYP21A2沉默組0.7...

【文章來源】： 兵團醫(yī)學. 2020,18(02)

【文章頁數(shù)】：3 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 實驗方法
        1.2.1 試劑配制
        1.2.2 細胞培養(yǎng)基本操作方法
            1.2.2.1 細胞復(fù)蘇
            1.2.2.2 細胞傳代
            1.2.2.3 細胞凍存
        1.2.3 實驗分組
        1.2.4 qRT-PCR驗證基因表達
    1.3 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]21-羥化酶缺乏導(dǎo)致腎上腺皮質(zhì)增生癥的研究進展 [J]. 劉英華,陳瑛,王三男.  中國優(yōu)生與遺傳雜志. 2014(12)



本文編號：3534153