目的:探討炎癥微環(huán)境對Wistar大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（rBMSCs）成骨分化Periostin基因表達的影響。方法:采用全骨髓貼壁法分離和培養(yǎng)rBMSCs,取第3代rBMSCs成骨、成脂分化誘導(dǎo);10μg/L TNF-α作用于rBMSCs模擬炎癥微環(huán)境,采用CCK-8法檢測細胞增殖活性,qRT-PCR檢測IL-1β及TNF-α的基因表達。將第3代rBMSCs分成對照組（OM）、炎癥組（OM+TNF-α）進行成骨誘導(dǎo),茜素紅染色及鈣離子沉積量檢測,在成骨誘導(dǎo)的第7、14天采用qRT-PCR檢測細胞中Periostin和Runx2的基因表達水平,Western blot檢測Periostin蛋白表達量。結(jié)果:全骨髓貼壁法成功分離培養(yǎng)rBMSCs;炎癥組細胞TNF-α及IL-1β的基因表達水平分別是對照組的1.8倍（P<0.05）、2.1倍（P<0.01）;炎癥組較對照組成骨能力下降,相關(guān)成骨基因表達量降低;成骨誘導(dǎo)后炎癥組的Periostin基因及蛋白表達水平較對照組明顯降低（P<0.05）。結(jié)論:炎癥微環(huán)境下誘導(dǎo)rBMSCs成骨分化Periostin基因表達水平下降,... 

【文章來源】：口腔醫(yī)學(xué)研究. 2020,36(12)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

倒置顯微鏡觀察大鼠BMSCs及成骨成脂分化(×40)

CCK-8檢測結(jié)果(圖2)顯示,從第3天起兩組細胞出現(xiàn)差異,均在第5天細胞增殖活性降低,開始進入平臺期。炎癥刺激組細胞增殖能力較正常對照組弱(P<0.05)。qRT-PCR結(jié)果顯示實驗組TNF- α基因表達水平是對照組的1.8倍(P<0.05),IL-1β基因表達水平是對照組的2.1倍(P<0.01),見圖3。2.3 茜素紅染色

茜素紅染色結(jié)果見圖4。鈣離子沉積量的半定量分析顯示,炎癥組(圖4b)細胞礦化結(jié)節(jié)較對照組(圖4a)明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(對照組、炎癥組的A值分別為0.380±0.002、0.310±0.003,t=14.8,P<0.001。圖4 茜素紅染色大體觀

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Interleukin-1β is a potential therapeutic target for periodontitis: a narrative review[J]. Ran Cheng,Zhiwu Wu,Mingming Li,Meiying Shao,Tao Hu.  International Journal of Oral Science. 2020(01)
[2]Periostin在牙周膜作用的研究進展[J]. 丁瑞霞,王慧明.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2019(07)
[3]慢性牙周炎中腫瘤壞死因子ɑ對骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化的調(diào)控作用[J]. 李曉光,王一珠,郭斌.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017(03)
[4]直流電場對炎癥微環(huán)境下的rBMSCs成骨的影響[J]. 韓巍,王瀟宇,高羽萱,劉娜,張維,李鴻波.  口腔頜面修復(fù)學(xué)雜志. 2017(02)
[5]炎性環(huán)境下牙周膜、骨髓間充質(zhì)干細胞骨向分化差異性的研究[J]. 張靜,陳彬,段銀鐘,孟箭.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2014(10)



本文編號：3528044